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rebore

铜虫 (小有名气)

[求助] 配制Tris-HCL缓冲溶液一定需要加NaCl吗?已有3人参与

如题。如果需要的话,那么加入NaCl的量应该怎么控制?
坐等回复了。
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一路到头

木虫 (小有名气)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:25
我也不知道!  但是我在上生物分离工程这门课的时候做实验“碱性磷酸单酯酶(AKP)的分离、纯化和鉴定”的时候遇到两种缓冲液:缓冲液Ⅰ:0.01mol/L PH8.0 Tris-HCl(1mM MgCl2+0.16M尿素)、缓冲液Ⅱ:0.01mol/L PH8.3 Tris-HCl(1mM MgCl2+0.16M尿素+1M NaCl)   据老师讲前者洗杂蛋白后者洗AKP出来。
4楼2012-12-29 00:13:58
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ivyvampire

新虫 (正式写手)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:16
我们没加过,直接调PH的
6楼2012-12-29 12:09:05
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一步一步

木虫 (著名写手)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:12
根据buffer的用途选择,我用的平衡缓冲液是加0.15MNaCl的。有些洗脱液,如碱性洗脱,一般加0.5M的NaCl。
7楼2012-12-29 15:49:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:05
Tris-HCl缓冲液是不需要加NaCl的。一般是配成1M的母液,pH根据实验需要用HCl调。实验中的缓冲液有需要不同的盐的,盐也是配成母液,一般NaCl配成5M的母液,MgCl2配成1M或者2M的母液。由于这些中性盐是不影响缓冲液的pH,所以只是根据实验需要加入缓冲液的。
9楼2012-12-30 02:44:35
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qianshengguo

铜虫 (小有名气)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:01
要看你这个buffer到底是做啥用。一般而言,如果不做特殊要求是不用加的。当然你也可以看一看常见缓冲液的标准配方,那可以说是比较正规的。
10楼2012-12-31 08:55:22
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隆溢

铜虫 (小有名气)

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条件中尿素及氯化镁的作用是什么啊?
阴离子交换层析的交换离子是氯离子,增加氯化钠的浓度一是增加氯离子的浓度,二是里面有钠离子,盐浓度增加有利于增加蛋白质的稳定性。
交流学习
11楼2013-01-14 19:12:35
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普通回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

Tris-HCL不是有不同的PH吗?Tris碱配置用盐酸调pH,好像没有氯化钠吧,你把配方拿上来看看?
Thank-you,so-blue.
2楼2012-12-28 10:47:35
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rebore

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2012-12-28 10:47:35
Tris-HCL不是有不同的PH吗?Tris碱配置用盐酸调pH,好像没有氯化钠吧,你把配方拿上来看看?

是说用氯化钠来固定离子浓度,我想知道到底有没有这个必要。
因为看配置Tris-HCL这种缓冲溶液时,有的有加氯化钠,有的没加氯化钠。
不经一番寒彻苦,怎得梅花扑鼻香。
3楼2012-12-28 11:25:47
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和谐村

金虫 (著名写手)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:20
不需要,,,,先溶tris,用盐酸跳到需要的PH就行了
5楼2012-12-29 11:35:49
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egaoxy

铁杆木虫 (著名写手)

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:08
根据你实验的对象确定需要不需要加,就是以前学习过的具体问题具体分析
8楼2012-12-29 22:06:45
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