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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 新手求助：10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液怎么配呢？
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zymoshengren

银虫 (初入文坛)

[求助] 新手求助：10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液怎么配呢？

新手求助：10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液如何配。
刚刚接触生物化学方面的实验，溶液都不知道怎么配，所以来求助大家，希望大家能够告知，或者推荐相关书籍能够学习相关溶液的配置方法。在这里先谢谢了！
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1楼2012-04-20 22:51:46
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回帖置顶 ( 共有1个 )

zymoshengren

银虫 (初入文坛)
zymoshengren: 回帖置顶 2012-04-21 00:30:18
是我问的不清楚，应该是1MKCL包含10 mM Tris-HCl 和 1 mM EDTA，在室温下PH值为8.0的溶液如何配置，谢谢大家了
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4楼2012-04-21 00:30:06
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
telomerase: 金币+3, good。。。。。。。。。。 2012-04-21 13:09:00
zymoshengren: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 很详细，非常感谢！！ 2012-04-22 19:31:09
你要是经常用的话，建议你配置点母液放起来。

首先是1M Tris-HCl (pH 8.0)母液。
①        称取121.1 g Tris-Base，加入700 ml双蒸水，放置转子，旋转混合溶解。
②        pH计校准：从4 ℃冰箱取出pH6.86、pH9.18的电极缓冲液，将pH9.18的电极缓冲液倒出50 ml使用，剩余放入4 ℃冰箱。将电极缓冲液温度调节至25 ℃±0.2 ℃，然后按照pH6.86、pH9.18的顺序对pH计进行校准。
③        Tris-Base完全溶解后，，然后加入浓盐酸进行酸度调节（加入浓盐酸后温度会升高），调至接近目的pH时，观察温度变化并用加热（水浴，微波）或冰浴的方法调节温度至25 ℃±0.2 ℃，使温度在25 ℃±0.2 ℃时刚好达到所需pH值（pH值允许误差±0.01）。
④        pH值调节完毕后，用容量瓶定容至1 L，0.45μm滤膜过滤，倒入试剂瓶中保存，标记好日期和名称。
⑤        配1 L pH8.0的Tris，约需要42 ml浓盐酸。

其次2M KCl 1 L母液
①        称取149.1g KCl，加入700 ml双蒸水，漩涡混合约30 min后静置使未溶化完全的KCl颗粒沉降，将溶液倒入容量瓶或量筒中，然后用少量双蒸水溶化烧杯底部KCl颗粒，重复几次以溶化完全，定容至1 L，0.45μm滤膜过滤。

最后是0.5 M EDTA(pH 8.0)母液
①        称取186.1 g Na2EDTA•2H2O，置于1 L烧杯中，加入800 ml双蒸水，漩涡搅拌混合，加入固体NaOH调节PH至8.0（约20 g NaOH），完全溶解后，加水定容至1 L，0.45 μm滤膜过滤。
②        注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。
③        标记好名称和日期，室温保存。

所以10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液，你只要取10ml 1M Tris-HCl (pH 8.0)母液,500ml  2M KCl 母液，2ml  0.5 M EDTA(pH 8.0)母液，最后定容到1L即可。
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5楼2012-04-21 10:06:37
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
telomerase: 金币+2, good 2012-04-21 13:08:42
向楼主推荐分子克隆，上面有很详细的配法，在小木虫里面搜索一下，一定有下载的
1M Tris (crystallized free base)
Tris(hydroxymethyl) aminomethane
FW 121.4 g/mol
60.57 g in 0.5L mq water
pH to 8.0 using HCl
这个是1MTris-HCL(PH=8.0)的配方
1000mM的KCl就是1MKCl 称取75gKCl粉末溶解在1000ml水里就ok了
Diaminoethane tetraacetic acid
FW 372.2 g/mol
37.2 g in 100ml mq water
pH to 8.0 using NaOH这是1mMEDTA的配法
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我就是我
2楼2012-04-20 23:32:17
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zymoshengren

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-04-20 23:32:17:
向楼主推荐分子克隆，上面有很详细的配法，在小木虫里面搜索一下，一定有下载的
1M Tris (crystallized free base)
Tris(hydroxymethyl) aminomethane
FW 121.4 g/mol
60.57 g in 0.5L mq water
pH to 8.0 u ...

先谢谢了~应该我问的不是很清楚，文章中说的是Measurements are performed in 1M KCl salt solution of the stated molarity containing 10 mM Tris-HCl and 1 mM EDTA at pH 8.0 at room temperature.我想配置文章中说的这种溶液，并不是3种。这种混合溶液应该怎么配呢？
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3楼2012-04-21 00:26:35
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chibang1220

木虫 (著名写手)
问问师兄师姐，很简单的
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人的差别在于业余时间
6楼2012-04-22 21:49:30
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weandyouzhy

木虫 (小有名气)
很是有用！
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everything*will*be*OK！so*never*give*up,man!
7楼2012-04-29 19:00:41
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1026687240

新虫 (初入文坛)
10mM Tris-HCl ，0.1M KCl，10mM EDTA 最后在室温下PH8,怎么配制呢
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认真，圆融
8楼2012-11-23 16:52:52
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gebiren18

银虫 (小有名气)
看你配多少了，每种成分所用量都是：体积x浓度x分子量 的结果，再将称好的各成分用水溶解，最后定容得你所要的体积就好了。
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9楼2012-11-28 17:41:31
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dshlove at 2012-04-21 10:06:37
你要是经常用的话，建议你配置点母液放起来。

首先是1M Tris-HCl (pH 8.0)母液。
①        称取121.1 g Tris-Base，加入700 ml双蒸水，放置转子，旋转混合溶解。
②        pH计校准：从4 ℃冰箱取出pH6.86、pH9.18的电极缓 ...

那请问最后定容到1L后，PH值没有变吗
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10楼2015-01-29 08:39:00
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