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新手求助：10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液怎么配呢？
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新手求助：10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液如何配。 刚刚接触生物化学方面的实验，溶液都不知道怎么配，所以来求助大家，希望大家能够告知，或者推荐相关书籍能够学习相关溶液的配置方法。在这里先谢谢了！ |
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4楼2012-04-21 00:30:06
dshlove
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你要是经常用的话，建议你配置点母液放起来。 首先是1M Tris-HCl (pH 8.0)母液。 ① 称取121.1 g Tris-Base，加入700 ml双蒸水，放置转子，旋转混合溶解。 ② pH计校准：从4 ℃冰箱取出pH6.86、pH9.18的电极缓冲液，将pH9.18的电极缓冲液倒出50 ml使用，剩余放入4 ℃冰箱。将电极缓冲液温度调节至25 ℃±0.2 ℃，然后按照pH6.86、pH9.18的顺序对pH计进行校准。 ③ Tris-Base完全溶解后，，然后加入浓盐酸进行酸度调节（加入浓盐酸后温度会升高），调至接近目的pH时，观察温度变化并用加热（水浴，微波）或冰浴的方法调节温度至25 ℃±0.2 ℃，使温度在25 ℃±0.2 ℃时刚好达到所需pH值（pH值允许误差±0.01）。 ④ pH值调节完毕后，用容量瓶定容至1 L，0.45μm滤膜过滤，倒入试剂瓶中保存，标记好日期和名称。 ⑤ 配1 L pH8.0的Tris，约需要42 ml浓盐酸。 其次2M KCl 1 L母液 ① 称取149.1g KCl，加入700 ml双蒸水，漩涡混合约30 min后静置使未溶化完全的KCl颗粒沉降，将溶液倒入容量瓶或量筒中，然后用少量双蒸水溶化烧杯底部KCl颗粒，重复几次以溶化完全，定容至1 L，0.45μm滤膜过滤。 最后是0.5 M EDTA(pH 8.0)母液 ① 称取186.1 g Na2EDTA•2H2O，置于1 L烧杯中，加入800 ml双蒸水，漩涡搅拌混合，加入固体NaOH调节PH至8.0（约20 g NaOH），完全溶解后，加水定容至1 L，0.45 μm滤膜过滤。 ② 注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。 ③ 标记好名称和日期，室温保存。 所以10mM Tris-HCl (pH 8.0)，1000mM KCl，1mM EDTA溶液，你只要取10ml 1M Tris-HCl (pH 8.0)母液,500ml 2M KCl 母液，2ml 0.5 M EDTA(pH 8.0)母液，最后定容到1L即可。 |
5楼2012-04-21 10:06:37
wtyyyyy1988
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向楼主推荐分子克隆，上面有很详细的配法，在小木虫里面搜索一下，一定有下载的 1M Tris (crystallized free base) Tris(hydroxymethyl) aminomethane FW 121.4 g/mol 60.57 g in 0.5L mq water pH to 8.0 using HCl 这个是1MTris-HCL(PH=8.0)的配方 1000mM的KCl就是1MKCl 称取75gKCl粉末溶解在1000ml水里就ok了 Diaminoethane tetraacetic acid FW 372.2 g/mol 37.2 g in 100ml mq water pH to 8.0 using NaOH这是1mMEDTA的配法 |
2楼2012-04-20 23:32:17
3楼2012-04-21 00:26:35
chibang1220
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