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关于培养基中白色不溶性沉淀物 已有3人参与
我有2个项目在做大肠的表达,A项目还行,但是另一个B项目遇上问题了,我做了3次,每次B项目的培养基灭菌后有白色不溶性沉淀,在5L罐里像雪花一样飞,时多时少,直接影响我的产物表达。A项目和B项目的培养基配方有一些差别,蛋白胨和酵母粉的量A项目总量较少(比例1.6:1),B项目总量较多(比例1:1),A项目的培养基中没有硫酸铵,B项目中加了1g/L的硫酸铵。其余营养物质就是磷酸盐和硫酸镁(硫酸镁都是1g/L的浓度)。现在就是A项目的培养基做了近十次,一次也没有不溶性沉淀,B项目每次都有。究竟是什么原因?我把培养基放在小瓶里,发现硫酸铵过量,4g/L反而澄清,还有我换成氯化铵也是澄清,换成无水硫酸钠就有沉淀。硫酸盐在作怪?有没有有经验的朋友给点提示,最好有解决办法,解决不溶性沉淀的问题。
1、消泡剂;2、硫酸根;3、磷酸氢二钾吸潮引入碳酸氢盐;4、铵离子把蛋白质沉淀了;5初始pH的问题 |
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