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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 高温灭菌后的培养基总是有沉淀，怎么办？
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郭胡了了

木虫 (正式写手)

[求助] 高温灭菌后的培养基总是有沉淀，怎么办？

如题高温灭菌后的培养基总是有沉淀，怎么办？求高人赐教
培养基成分如下：
K2HPO4 .................0.7 g
KH2PO4 .................0.54 g
MgSO4 . 7H2O ...........1.0 g
CaCl2 . 2H2O ...........0.2 g
FeSO4 . 7H2O ...........4.0 mg
NH4Cl ..................0.5 g
ZnSO4 . 7H2O .........100.0 mcg
MnCl2 . 4H2O ..........30.0 mcg
H3BO3 ................300.0 mcg
CoCl2 . 6H2O .........200.0 mcg
CuCl2 . 2H2O ..........10.0 mcg
NiCl2 . 6H2O ..........20.0 mcg
Na2MoO4 . 2H2O.........60.0 mcg
Agar (if needed)......15.0 g
Distilled water........1.0 L
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有梦想的地方
1楼 2012-06-13 21:22:59
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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郭胡了了: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-14 07:59:49
Ca和Fe配母液，单独灭菌，用前现加
mcg级别的那些，配母液配在一起，单独灭菌，用前现加

再者，CaSO4是不是沉淀来着？你确定Ca的浓度是对的？
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小木虫之有关部门负责人
2楼2012-06-13 23:42:45
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
偶的意思是，Ca和Fe也是分开灭的
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小木虫之有关部门负责人
3楼2012-06-13 23:43:49
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lgs1

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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郭胡了了: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-14 08:01:49
我用CaCl2溶液灭菌也会产生沉淀，一般都是用0.22μm滤器过滤再加到培养基里面
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4楼2012-06-14 00:48:24
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郭胡了了

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by scelab at 2012-06-13 23:42:45
Ca和Fe配母液，单独灭菌，用前现加
mcg级别的那些，配母液配在一起，单独灭菌，用前现加

再者，CaSO4是不是沉淀来着？你确定Ca的浓度是对的？

非常感谢，Ca的浓度没有问题，买的菌株附带的培养基成分就是这样的
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有梦想的地方
5楼2012-06-14 08:00:40
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郭胡了了

木虫 (正式写手)
内容已删除
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有梦想的地方
6楼2012-06-14 08:01:41
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lt520dc

金虫 (初入文坛)
应该是反应产生沉淀，建议查下培养基具体详细的配置方法
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7楼2012-06-14 08:23:07
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xujb32

银虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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郭胡了了: 金币+5, ★有帮助 2012-06-14 18:35:39
上面都回答了，分开灭菌
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江湖笑笑生
8楼2012-06-14 08:39:37
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阿德54007

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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scelab: 金币+7, 谢谢热心交流~ :) 2012-06-14 15:34:54
郭胡了了: 金币+5, ★有帮助 2012-06-14 18:36:48
看了楼主的培养基配方初步判断可能是培养植物愈伤组织一类的吧。我研一的时候做过一年的玉米愈伤组织培养。极少出现这样的问题。在配制无机盐母液的时候先把不会发生沉淀反应的几种药品混合最后才加入易反应的药品，因为这样一来，有之前其他药水的稀释，沉淀反应就会极大的减少甚至不会发生。在后期配制培养基的时候，这些盐浓度已经很低，这些配方都是前人长时间摸索出来的，所以一般是不会出现沉淀的。仔细检查一下母液的配制是否有问题。我曾经在配制母液的时候，粗心将CuSO4·5H2O和ZnSO4·5H2O拿混了，导致我们实验室一周内配出的培养基全部报废，灭菌后有絮状沉淀，经过层层排除原因，最终找到母液有问题。
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
9楼2012-06-14 09:06:27
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wangjinas

木虫之王 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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郭胡了了: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-14 18:37:39
出现沉淀肯定是某些成分发生化学反应了，最直接的方法是把不会出现沉淀的配在一起，其余的成分逐一单独加入灭菌，看是否出现沉淀，也就是排除法，呵呵~
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10楼2012-06-14 09:30:24
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