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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 培养基灭菌后pH波动太大
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丸子菌~

新虫 (初入文坛)

[求助] 培养基灭菌后pH波动太大

配置培养基时需要调pH，培养基中含有一水麦芽糖、酵母提取物、磷酸氢二/二氢钾、氯化钠，原始pH6.8，调至7、8、9、10后115度灭菌。灭菌后颜色随pH升高由浅黄变至褐色，测量pH都在6.8左右，找不到原因，大家帮帮忙分析下，谢啦~

PS：pH对产物形成特别重要
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1楼2011-09-04 20:24:53
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michaelcyq

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

丸子菌~(金币+2): 2011-09-08 10:30:33
原因无非就是培养基中物质高温下分解了呗。
可以考虑过滤灭菌，当然过滤器皿事先要高温灭菌，过滤过程也最好在无菌环境下进行.
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2楼2011-09-04 21:16:15
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丸子菌~

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by michaelcyq at 2011-09-04 21:16:15:
原因无非就是培养基中物质高温下分解了呗。
可以考虑过滤灭菌，当然过滤器皿事先要高温灭菌，过滤过程也最好在无菌环境下进行.

我想知道究竟是什么反应引起的，培养基里并没有非常规的物品啊，按照实验室经验这应该是可以用蒸汽灭菌的吧
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3楼2011-09-04 21:53:03
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
高中化学的时候 磷酸盐是个平衡反应~~
高温高压 正好是促进平衡向 一边推进的因素 至于究竟是生成磷酸三盐 还是 磷酸二氢盐云云 真是不想费脑子考虑，不过 楼上说过滤除菌 不失是一个好办法。
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4楼2011-09-04 22:08:44
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wuyuan1992

金虫 (正式写手)
一直奇怪为什么含单糖和二糖的培养基要减压灭菌，询问老大，老大说培养基中的单糖和二糖在高压高温下及其容易发生分解，会使颜色变深。我用高压灭了一次含有蔗糖的培养基，没有发生这种现象，今天看了您的帖子，原来还真是可能，受教了～
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非淡泊无以明志，非宁静无以致远。
5楼2011-09-05 13:33:44
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curiousdog

银虫 (小有名气)
去问张老师～
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理可顿悟，事须渐修。
6楼2011-09-05 14:40:00
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丸子菌~

新虫 (初入文坛)
★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~ 2011-09-06 13:54:27
引用回帖:
5楼: Originally posted by wuyuan1992 at 2011-09-05 13:33:44:
一直奇怪为什么含单糖和二糖的培养基要减压灭菌，询问老大，老大说培养基中的单糖和二糖在高压高温下及其容易发生分解，会使颜色变深。我用高压灭了一次含有蔗糖的培养基，没有发生这种现象，今天看了您的帖子，原 ...

蔗糖会分解成单糖，一般是九十多度灭吧我记得。单糖很稀的话不怎么变色（比如说千分之几），而且pH越高越容易变色
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7楼2011-09-05 20:27:35
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w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~ 2011-09-06 13:54:35
麦芽糖一般是过滤灭菌，使用前加入，不然极易碳化变黑。
蔗糖的分解其实不明显，远不如琼脂的变色厉害。要么你减压灭菌，115度15分钟这种，再就是检查一下有没有琼脂，有的话，灭完菌就直接手动放气。（只对老式国产灭菌锅，进口灭菌锅一般有自动加速降压的功能）
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How about the future？
8楼2011-09-05 21:35:46
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zier1011

木虫 (著名写手)
引用回帖:
1071010楼: Originally posted by wuyuan1992 at 2011-09-05 13:33:44:
一直奇怪为什么含单糖和二糖的培养基要减压灭菌，询问老大，老大说培养基中的单糖和二糖在高压高温下及其容易发生分解，会使颜色变深。我用高压灭了一次含有蔗糖的培养基，没有发生这种现象，今天看了您的帖子，原 ...

还原性糖和含氮类物质在高温条件下会发生美拉德反应，颜色加深，蔗糖是非还原性糖
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花还香香的
9楼2012-05-03 09:50:10
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
灭菌完因为有蒸发，肯定pH会变化。抱紧一点，但是不要塞太紧哦~降低蒸发，就可以了
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
10楼2012-05-14 17:09:40
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