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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 求助：有没有人培养过D10.G4.1细胞？
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wzhgaochuan

新虫 (小有名气)

[求助] 求助：有没有人培养过D10.G4.1细胞？已有1人参与

最近在培养D10.G4.1细胞，按照ATCC规定要求配制培养基，但发现死细胞很多，且细胞边长边死，都养了一周多了还养不起来，想求助一下培养过该细胞的战友们，有没有什么培养经验分享一下，急啊！谢谢了~~~
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1楼2014-07-28 11:22:26
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)
10% fetal bovine serum
0.05 mM 2-mercaptoethanol
10 pg/ml mouse IL-1 alpha (R&D Systems, Catalog No. 400ML)
以上这些东西都加了吗？确定有没有支原体污染？
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2楼2014-07-28 14:13:57
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wzhgaochuan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-28 14:13:57
10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)
10% fetal bovine serum
0.05 mM 2-mercaptoethanol
10 pg/ml mouse IL-1 alpha (R&D Systems, Catalog No.  ...

以上全部都加了，另外我怕有污染，加了1%的PS.不知道有没有影响。细胞从ATCC买回来后刚复苏1周，应该没有支原体污染，我们实验室还没有出现过支原体污染。
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3楼2014-07-28 14:19:33
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2014-07-28 14:19:33
以上全部都加了，另外我怕有污染，加了1%的PS.不知道有没有影响。细胞从ATCC买回来后刚复苏1周，应该没有支原体污染，我们实验室还没有出现过支原体污染。...

你们从ATCC买的细胞是冻着运输的？
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4楼2014-07-28 14:35:59
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wzhgaochuan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-28 14:35:59
你们从ATCC买的细胞是冻着运输的？...

对啊，干冰运输，不过我们在液氮里放了小半年才复苏的。
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5楼2014-07-28 17:27:55
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2014-07-28 17:27:55
对啊，干冰运输，不过我们在液氮里放了小半年才复苏的。...

干冰运输总觉得有点不太放心 死的细胞可能会很多
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6楼2014-07-29 10:45:39
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wzhgaochuan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-28 14:13:57
10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)
10% fetal bovine serum
0.05 mM 2-mercaptoethanol
10 pg/ml mouse IL-1 alpha (R&D Systems, Catalog No.  ...

你好，请问你现在还在养D10.G4.1细胞吗？是这样，我的10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)不够了，新订的又还没有到货，想借一些解燃眉之急，如果有整瓶的更好，等到货会整瓶奉还。谢谢，真的很着急，谢谢。
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7楼2015-03-09 08:52:57
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LPEHDTEA1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2015-03-09 08:52:57
你好，请问你现在还在养D10.G4.1细胞吗？是这样，我的10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)不够了，新订的又还没有到货，想借一些解燃眉之急，如果有整瓶 ...

请问你的这个试剂还有吗？是从国内代理商买的吗？可以分享一下吗？

发自小木虫IOS客户端
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8楼2018-03-15 11:06:58
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Ruby225

新虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2014-07-28 14:19:33
以上全部都加了，另外我怕有污染，加了1%的PS.不知道有没有影响。细胞从ATCC买回来后刚复苏1周，应该没有支原体污染，我们实验室还没有出现过支原体污染。...

我也刚从ATCC买回来养，最开始一周一直有死细胞，后面从T175慢慢养回到T25，T-STIM是自己制备的，后面怀疑不好，所以额外添加了hIL2，细胞慢慢长起来了，也有2周的时间才恢复，现在不加hIL2一样长的很好
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9楼2018-07-12 14:30:28
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