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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wzhgaochuan

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 求助:有没有人培养过D10.G4.1细胞? 已有1人参与

最近在培养D10.G4.1细胞,按照ATCC规定要求配制培养基,但发现死细胞很多,且细胞边长边死,都养了一周多了还养不起来,想求助一下培养过该细胞的战友们,有没有什么培养经验分享一下,急啊!谢谢了~~~
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风信子寻梦

超级版主

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)
10% fetal bovine serum
0.05 mM 2-mercaptoethanol
10 pg/ml mouse IL-1 alpha (R&D Systems, Catalog No. 400ML)
以上这些东西都加了吗?确定有没有支原体污染?
2楼2014-07-28 14:13:57
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wzhgaochuan

实习版主

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引用回帖:
2楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-28 14:13:57
10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)
10% fetal bovine serum
0.05 mM 2-mercaptoethanol
10 pg/ml mouse IL-1 alpha (R&D Systems, Catalog No.  ...

以上全部都加了,另外我怕有污染,加了1%的PS.不知道有没有影响。细胞从ATCC买回来后刚复苏1周,应该没有支原体污染,我们实验室还没有出现过支原体污染。
3楼2014-07-28 14:19:33
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风信子寻梦

版主

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引用回帖:
3楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2014-07-28 14:19:33
以上全部都加了,另外我怕有污染,加了1%的PS.不知道有没有影响。细胞从ATCC买回来后刚复苏1周,应该没有支原体污染,我们实验室还没有出现过支原体污染。...

你们从ATCC买的细胞是冻着运输的?
4楼2014-07-28 14:35:59
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wzhgaochuan

实习版主

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引用回帖:
4楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-28 14:35:59
你们从ATCC买的细胞是冻着运输的?...

对啊,干冰运输,不过我们在液氮里放了小半年才复苏的。
5楼2014-07-28 17:27:55
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风信子寻梦

版主

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5楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2014-07-28 17:27:55
对啊,干冰运输,不过我们在液氮里放了小半年才复苏的。...

干冰运输总觉得有点不太放心 死的细胞可能会很多
6楼2014-07-29 10:45:39
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wzhgaochuan

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-28 14:13:57
10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)
10% fetal bovine serum
0.05 mM 2-mercaptoethanol
10 pg/ml mouse IL-1 alpha (R&D Systems, Catalog No.  ...

你好,请问你现在还在养D10.G4.1细胞吗?是这样,我的10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)不够了,新订的又还没有到货,想借一些解燃眉之急,如果有整瓶的更好,等到货会整瓶奉还。谢谢,真的很着急,谢谢。
7楼2015-03-09 08:52:57
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LPEHDTEA1

实习版主

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引用回帖:
7楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2015-03-09 08:52:57
你好,请问你现在还在养D10.G4.1细胞吗?是这样,我的10% T-STIM with Con A (rat IL-2 culture supplement ) Becton Dickinson, Catalog No. 354115)不够了,新订的又还没有到货,想借一些解燃眉之急,如果有整瓶 ...

请问你的这个试剂还有吗?是从国内代理商买的吗?可以分享一下吗?

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8楼2018-03-15 11:06:58
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Ruby225

主管区长

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3楼: Originally posted by wzhgaochuan at 2014-07-28 14:19:33
以上全部都加了,另外我怕有污染,加了1%的PS.不知道有没有影响。细胞从ATCC买回来后刚复苏1周,应该没有支原体污染,我们实验室还没有出现过支原体污染。...

我也刚从ATCC买回来养,最开始一周一直有死细胞,后面从T175慢慢养回到T25,T-STIM是自己制备的,后面怀疑不好,所以额外添加了hIL2,细胞慢慢长起来了,也有2周的时间才恢复,现在不加hIL2一样长的很好
9楼2018-07-12 14:30:28
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