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呀薯条

金虫 (小有名气)

[求助] 感受态细胞的制备 已有6人参与

第一次做DNA克隆与表达。想采用氯化钙法感受态细胞。
想制备高效的感受态细胞,氯化钙的级别有要求吗?因为没有液氮速冻,打算直接分装后先放在冰上,然后直接放入-50度可以吗?
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-24 21:23:15
呀薯条: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-26 09:25:00
我一般都从国内试剂公司买的氯化钙,高温灭菌后直接放4度都没问题,制备感受态的时候从冰箱里拿出来放冰盒里,转化效率肯定不如商品的,但是阳性对照照样是满版的转化子。
大家相互帮助哈
2楼2014-07-24 20:22:57
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-24 21:23:27
呀薯条: 金币+1, 有帮助 2014-07-26 09:25:11
菌株与氯化钙都很重要,水,耗材要很干净,细节处理好了,效率就没问题了

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-24 21:05:54
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zhong601

禁虫 (初入文坛)


感谢参与,应助指数 +1
呀薯条: 金币+1, 有帮助 2014-07-26 09:25:28
本帖内容被屏蔽

4楼2014-07-25 17:34:16
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xiaobai1999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-28 16:24:40
呀薯条: 金币+1, 有帮助 2014-07-29 19:52:33
防杂菌,防污染,这两个比较重要。另外建DNA文库对转化的要求比较高,不建库的话随意啦。
5楼2014-07-28 16:17:12
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yangmin0721

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhong601 at 2014-07-25 17:34:16
分装时注意操作规范及时间把握!

那个时间把握怎么讲呢?最近在做老是污染,脑袋都大了……
我将一如既往的相信自己,相信未来~!
6楼2014-08-01 17:12:46
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呀薯条

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yangmin0721 at 2014-08-01 17:12:46
那个时间把握怎么讲呢?最近在做老是污染,脑袋都大了……...

按照要求进行冰浴。冰浴后快速分装吧,我觉得。上次新做了一批,希望效率会高点
7楼2014-08-08 09:43:58
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nlbtr

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by yangmin0721 at 2014-08-01 17:12:46
那个时间把握怎么讲呢?最近在做老是污染,脑袋都大了……...

你是什么细胞,知道是什么污染吗?
8楼2014-08-26 11:17:15
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