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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 交流探讨 » 关于高效液相色谱的问题
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求知者001

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全球通，能否？！

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[求助] 关于高效液相色谱的问题 已有1人参与

做实验新手，求教问题如下：
内容：用高效液相测定水样中的抗生素含量
目的：由于抗生素在水体中含量比较低，基本上ng/L、μg/L级别的，我浓缩了300倍，想试验下能否用HPLC测出来。
问题：如何知道检测出来的峰是否是我想要的？测一个标样、一个样品对比保留时间？是否需要做下标准曲线，确定样品在检测范围内？
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人生最曼妙的风景，是内心的淡定与从容。
1楼 2014-07-19 19:07:11
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求知者001

荣誉版主 (知名作家)

全球通，能否？！

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引用回帖:
2楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-07-19 21:56:36
你的浓度很低，估计HPLC可能测不出来，尝试一下UPLC。
先用纯物质配好标样，进样，出峰位置就是你的物质，柱压稳定，出峰时间基本不变。
测样品前，先做标准曲线，再测样品，获取你的样品浓度。
不知道样品浓度的 ...

我现在就是不知道样品的浓度，那已经配制了一个标样与样品，用高效液相测的话，出峰的保留时间对应起来就是可以检测到样品中的目标物是吧？那怎么确定浓度呢？
学校只有HPLC，木有UPLC。。
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人生最曼妙的风景，是内心的淡定与从容。
3楼2014-07-19 22:05:58
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
求知者001: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 3Q啦，谢谢，很有帮助~ 2014-07-23 10:34:01
你的浓度很低，估计HPLC可能测不出来，尝试一下UPLC。
先用纯物质配好标样，进样，出峰位置就是你的物质，柱压稳定，出峰时间基本不变。
测样品前，先做标准曲线，再测样品，获取你的样品浓度。
不知道样品浓度的情况下，做标准曲线之前，建议先配制一个标样与一个样品，测其浓度，比对一下自己的浓度，再做标线。
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加油！
2楼2014-07-19 21:56:36
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

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gaofeng925: 金币+1, 积极应助 2014-07-21 08:39:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by 求知者001 at 2014-07-19 22:05:58
我现在就是不知道样品的浓度，那已经配制了一个标样与样品，用高效液相测的话，出峰的保留时间对应起来就是可以检测到样品中的目标物是吧？那怎么确定浓度呢？
学校只有HPLC，木有UPLC。。...

嗯，测定时注意柱压变化，若是稳定，出峰时间稳定。可以通过峰高度对比，粗略的估计样品浓度。一般，采用积分面积计算浓度。
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加油！
4楼2014-07-19 22:08:53
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