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求知者001

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[求助] 关于高效液相色谱的问题 已有1人参与

做实验新手,求教问题如下:
内容:用高效液相测定水样中的抗生素含量
目的:由于抗生素在水体中含量比较低,基本上ng/L、μg/L级别的,我浓缩了300倍,想试验下能否用HPLC测出来。
问题:如何知道检测出来的峰是否是我想要的?测一个标样、一个样品对比保留时间?是否需要做下标准曲线,确定样品在检测范围内?
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liwentao2010

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山涛

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
求知者001: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 3Q啦,谢谢,很有帮助~ 2014-07-23 10:34:01
你的浓度很低,估计HPLC可能测不出来,尝试一下UPLC。
先用纯物质配好标样,进样,出峰位置就是你的物质,柱压稳定,出峰时间基本不变。
测样品前,先做标准曲线,再测样品,获取你的样品浓度。
不知道样品浓度的情况下,做标准曲线之前,建议先配制一个标样与一个样品,测其浓度,比对一下自己的浓度,再做标线。
加油!
2楼2014-07-19 21:56:36
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求知者001

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引用回帖:
2楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-07-19 21:56:36
你的浓度很低,估计HPLC可能测不出来,尝试一下UPLC。
先用纯物质配好标样,进样,出峰位置就是你的物质,柱压稳定,出峰时间基本不变。
测样品前,先做标准曲线,再测样品,获取你的样品浓度。
不知道样品浓度的 ...

我现在就是不知道样品的浓度,那已经配制了一个标样与样品,用高效液相测的话,出峰的保留时间对应起来就是可以检测到样品中的目标物是吧?那怎么确定浓度呢?
学校只有HPLC,木有UPLC。。
人生最曼妙的风景,是内心的淡定与从容。
3楼2014-07-19 22:05:58
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liwentao2010

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gaofeng925: 金币+1, 积极应助 2014-07-21 08:39:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by 求知者001 at 2014-07-19 22:05:58
我现在就是不知道样品的浓度,那已经配制了一个标样与样品,用高效液相测的话,出峰的保留时间对应起来就是可以检测到样品中的目标物是吧?那怎么确定浓度呢?
学校只有HPLC,木有UPLC。。...

嗯,测定时注意柱压变化,若是稳定,出峰时间稳定。可以通过峰高度对比,粗略的估计样品浓度。一般,采用积分面积计算浓度。
加油!
4楼2014-07-19 22:08:53
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