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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 关于MTT操作的细节问题
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贺小灯

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于MTT操作的细节问题已有1人参与

我先用不同浓度的药物对细胞进行保护24h，之后加入相同浓度的毒物，24h后测吸光值。并且针对各组都设置了不加细胞，只加不同浓度药物及毒物的调零孔，我用各组吸光值减去相应的调零孔后，计算抑制率。
我的问题是：上面的操作算不算扣除本底，这种情况下，加入毒物前是否需要将药物吸出来？
希望有经验的朋友帮帮忙  谢啦
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1楼2014-07-11 22:07:02
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
需要将样品吸出来的，因为MTT法的原理是MTT被还原成甲臜显色，如果样品有还原性，会很大程度影响实验的准确性。
建议看一下ISO中关于细胞毒性实验评价的文件，原理和操作说的很具体。
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2楼2014-07-12 19:27:52
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贺小灯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-07-12 19:27:52
需要将样品吸出来的，因为MTT法的原理是MTT被还原成甲臜显色，如果样品有还原性，会很大程度影响实验的准确性。
建议看一下ISO中关于细胞毒性实验评价的文件，原理和操作说的很具体。

谢谢您的回复 再加毒物之前，具有保护作用的药是否要吸出来 我上面做的扣除本底 是不是能把保护的药与毒物间的作用抵消？
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3楼2014-07-14 10:29:16
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

保护药物是否吸出要看你的实验目的
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4楼2014-07-14 15:15:29
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