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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MTT做细胞毒性测试的无菌操作问题
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

[求助] MTT做细胞毒性测试的无菌操作问题 已有1人参与

前段时间做MTT测细胞毒性时，因为枪头掉在了PBS里面，使得PBS染菌，然后96孔板也染菌了，那平时加药诱导过程中，药不也引入细菌了吗？用滤头过滤一下药能除去细菌吗？
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1楼 2014-05-06 09:20:22
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
luo_jiaojiao: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-05-06 10:05:53
我们加药和试剂都是在无菌细胞间操作的，配试剂都用纯水，每个环节都经过灭菌的，也包括枪头；你说的过滤，会不会使药液稀释，或者产生损失，还有药溶解不完全怎么办？

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青山不断，绿水长流
2楼2014-05-06 09:36:14
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 09:36:14
我们加药和试剂都是在无菌细胞间操作的，配试剂都用纯水，每个环节都经过灭菌的，也包括枪头；你说的过滤，会不会使药液稀释，或者产生损失，还有药溶解不完全怎么办？

对呀，就是这个问题，如果是在超净台用无菌水配药，药本身是固体，那么药在配成溶液前怎么灭菌呢？滤头过滤可能会损失一点吧，我之前的载药材料容易聚沉，用滤头过滤后就直接留滤头上了……所以后面都省去了过滤这个步骤
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3楼2014-05-06 09:44:54
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 09:44:54
对呀，就是这个问题，如果是在超净台用无菌水配药，药本身是固体，那么药在配成溶液前怎么灭菌呢？滤头过滤可能会损失一点吧，我之前的载药材料容易聚沉，用滤头过滤后就直接留滤头上了……所以后面都省去了过滤这 ...

要是药物比较稳定，你可以尝试灭菌，并且药物价格不是很贵哦
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青山不断，绿水长流
4楼2014-05-06 09:55:20
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 09:55:20
要是药物比较稳定，你可以尝试灭菌，并且药物价格不是很贵哦...

我一直以为药物是不能灭菌的呢，灭菌了会不会失效啊？
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5楼2014-05-06 09:56:26
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 09:56:26
我一直以为药物是不能灭菌的呢，灭菌了会不会失效啊？...

要是比较稳定，你可以尝试一下……但是一般药物是不会被细菌污染的，否则也会失效咯；所以你得想想是不是别的原因染菌咯
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青山不断，绿水长流
6楼2014-05-06 09:59:45
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 09:59:45
要是比较稳定，你可以尝试一下……但是一般药物是不会被细菌污染的，否则也会失效咯；所以你得想想是不是别的原因染菌咯...

原来如此啊，那要是药物灭菌的话，是直接照紫外就行，还是要用灭菌锅灭菌啊？
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7楼2014-05-06 10:03:46
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
7楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 10:03:46
原来如此啊，那要是药物灭菌的话，是直接照紫外就行，还是要用灭菌锅灭菌啊？...

难说；因为药物本身很多都很有苯环或者双键，紫外有可能会是胶联或者变性变型，高温也会；所以你试试嘛？最后验证就可以咯，还有哦，你这么一弄，说不定还会是奇特的发现——发现新的药物呢。
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青山不断，绿水长流
8楼2014-05-06 10:08:49
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 10:08:49
难说；因为药物本身很多都很有苯环或者双键，紫外有可能会是胶联或者变性变型，高温也会；所以你试试嘛？最后验证就可以咯，还有哦，你这么一弄，说不定还会是奇特的发现——发现新的药物呢。...

实验都做不出来还发现新药……我觉得药变性的可能性很大啊，所以，偷个懒，直接用无菌水配药吧……多谢啦~
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9楼2014-05-06 10:14:34
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hsingyu

木虫 (正式写手)
一般培养基都是加了双抗的，如果有少量细菌是不会感染的啊，我药品都在外面配制，加进细胞之前都不在无菌环境，还是没有染菌啊。操作注意吧。载体聚沉是要解决的问题，可以修饰PEG
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做最好的自己~
10楼2014-05-06 21:17:53
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