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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

[求助] MTT做细胞毒性测试的无菌操作问题 已有1人参与

前段时间做MTT测细胞毒性时,因为枪头掉在了PBS里面,使得PBS染菌,然后96孔板也染菌了,那平时加药诱导过程中,药不也引入细菌了吗?用滤头过滤一下药能除去细菌吗?
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
luo_jiaojiao: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-05-06 10:05:53
我们加药和试剂都是在无菌细胞间操作的,配试剂都用纯水,每个环节都经过灭菌的,也包括枪头;你说的过滤,会不会使药液稀释,或者产生损失,还有药溶解不完全怎么办?

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
2楼2014-05-06 09:36:14
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 09:36:14
我们加药和试剂都是在无菌细胞间操作的,配试剂都用纯水,每个环节都经过灭菌的,也包括枪头;你说的过滤,会不会使药液稀释,或者产生损失,还有药溶解不完全怎么办?

对呀,就是这个问题,如果是在超净台用无菌水配药,药本身是固体,那么药在配成溶液前怎么灭菌呢?滤头过滤可能会损失一点吧,我之前的载药材料容易聚沉,用滤头过滤后就直接留滤头上了……所以后面都省去了过滤这个步骤
3楼2014-05-06 09:44:54
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 09:44:54
对呀,就是这个问题,如果是在超净台用无菌水配药,药本身是固体,那么药在配成溶液前怎么灭菌呢?滤头过滤可能会损失一点吧,我之前的载药材料容易聚沉,用滤头过滤后就直接留滤头上了……所以后面都省去了过滤这 ...

要是药物比较稳定,你可以尝试灭菌,并且药物价格不是很贵哦
青山不断,绿水长流
4楼2014-05-06 09:55:20
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 09:55:20
要是药物比较稳定,你可以尝试灭菌,并且药物价格不是很贵哦...

我一直以为药物是不能灭菌的呢,灭菌了会不会失效啊?
5楼2014-05-06 09:56:26
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

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5楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 09:56:26
我一直以为药物是不能灭菌的呢,灭菌了会不会失效啊?...

要是比较稳定,你可以尝试一下……但是一般药物是不会被细菌污染的,否则也会失效咯;所以你得想想是不是别的原因染菌咯
青山不断,绿水长流
6楼2014-05-06 09:59:45
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 09:59:45
要是比较稳定,你可以尝试一下……但是一般药物是不会被细菌污染的,否则也会失效咯;所以你得想想是不是别的原因染菌咯...

原来如此啊,那要是药物灭菌的话,是直接照紫外就行,还是要用灭菌锅灭菌啊?
7楼2014-05-06 10:03:46
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HYZ221314

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引用回帖:
7楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-06 10:03:46
原来如此啊,那要是药物灭菌的话,是直接照紫外就行,还是要用灭菌锅灭菌啊?...

难说;因为药物本身很多都很有苯环或者双键,紫外有可能会是胶联或者变性变型,高温也会;所以你试试嘛?最后验证就可以咯,还有哦,你这么一弄,说不定还会是奇特的发现——发现新的药物呢。
青山不断,绿水长流
8楼2014-05-06 10:08:49
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-06 10:08:49
难说;因为药物本身很多都很有苯环或者双键,紫外有可能会是胶联或者变性变型,高温也会;所以你试试嘛?最后验证就可以咯,还有哦,你这么一弄,说不定还会是奇特的发现——发现新的药物呢。...

实验都做不出来还发现新药……我觉得药变性的可能性很大啊,所以,偷个懒,直接用无菌水配药吧……多谢啦~
9楼2014-05-06 10:14:34
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hsingyu

木虫 (正式写手)

一般培养基都是加了双抗的,如果有少量细菌是不会感染的啊,我药品都在外面配制,加进细胞之前都不在无菌环境,还是没有染菌啊。操作注意吧。载体聚沉是要解决的问题,可以修饰PEG
做最好的自己~
10楼2014-05-06 21:17:53
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