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zhr0708

金虫 (正式写手)

[求助] 如何鉴别DEAE-sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 已有1人参与

实验室有一个柱子的填料,时间放久了没贴标签,是DEAE-sepharose CL-6B 和 sepharose CL-6B 中的一种,但是不能确定,有没有鉴别的方法,求大神帮忙鉴别下
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追梦de蜗牛

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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zhr0708(99503102代发): 金币+15, 谢谢应助!希望继续关注食品版噢! 2015-10-09 16:16:10
两种填料的不同点就是一个含有DEAE配基,一个不含配基,含有配基的填料为弱阴离子交换树脂,可以吸附带负电荷的蛋白,而另一不带配基填料不会吸附带负电荷的蛋白。找到两者区别就可以设计实验:取一些细胞,破碎后离心收集上清(缓冲液pH略高些),将其分成两份,分别向其中加入等量的上述两种填料,之后离心收集填料,再讲填料放在少量1M氯化钠溶液中,离心收集上清,之后测OD280值,OD值两者差别较大,OD高的那个填料就是DEAE-sepharose。
2楼2015-10-09 15:16:18
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