24小时热门版块排行榜    

查看: 2140  |  回复: 5

Summersing

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:关于EGFP基因体外转录后不能表达的问题 已有1人参与

小弟初涉该领域,希望得到各位大牛指导!
小弟将EGFP克隆到pBLUE-T中,利用上游T7启动子做体外转录,得到EGFP的mRNA并加帽加尾并纯化。再做转染却始终完全不见表达。求教一下各位这个问题可能会出在哪儿?
另外大家那儿有没有表达效率较高的 EGFP上游含T7启动子的真核表达质粒?多谢多谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woshijinzhen

新虫 (初入文坛)

我们用的是pcDNA3.1,可以表达
2楼2015-05-22 22:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

确定eGFP基因的N端有Kozak序列吗?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-05-23 03:20:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

我勒个去,原来是挖坟帖
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-05-23 03:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WMQ青風軒

银虫 (小有名气)

请问解决了么?
5楼2021-04-24 15:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Summersing

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by WMQ青風軒 at 2021-04-24 15:51:49
请问解决了么?

这么多年了,我都忘了曾经问过这么个问题。。
6楼2021-09-03 17:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Summersing 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 招08考数学 +7 laoshidan 2026-03-20 16/800 2026-03-24 17:52 by 乌拉儿山脉
[考研] 289求调剂 +5 硕星赴 2026-03-23 5/250 2026-03-24 17:09 by hello七七
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗? +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 307求调剂 +11 冷笙123 2026-03-17 11/550 2026-03-22 20:16 by edmund7
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
信息提示
请填处理意见