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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助：关于EGFP基因体外转录后不能表达的问题
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Summersing

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：关于EGFP基因体外转录后不能表达的问题 已有1人参与

小弟初涉该领域，希望得到各位大牛指导！
小弟将EGFP克隆到pBLUE-T中，利用上游T7启动子做体外转录，得到EGFP的mRNA并加帽加尾并纯化。再做转染却始终完全不见表达。求教一下各位这个问题可能会出在哪儿？
另外大家那儿有没有表达效率较高的 EGFP上游含T7启动子的真核表达质粒？多谢多谢！
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1楼 2014-07-08 15:07:45
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woshijinzhen

新虫 (初入文坛)
我们用的是pcDNA3.1，可以表达
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2楼2015-05-22 22:48:32
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

确定eGFP基因的N端有Kozak序列吗？
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-05-23 03:20:22
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
我勒个去，原来是挖坟帖
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-05-23 03:20:57
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WMQ青風軒

银虫 (小有名气)
请问解决了么？
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5楼2021-04-24 15:51:49
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Summersing

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by WMQ青風軒 at 2021-04-24 15:51:49
请问解决了么？

这么多年了，我都忘了曾经问过这么个问题。。
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6楼2021-09-03 17:04:32
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