24小时热门版块排行榜    

查看: 2136  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Summersing

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:关于EGFP基因体外转录后不能表达的问题 已有1人参与

小弟初涉该领域,希望得到各位大牛指导!
小弟将EGFP克隆到pBLUE-T中,利用上游T7启动子做体外转录,得到EGFP的mRNA并加帽加尾并纯化。再做转染却始终完全不见表达。求教一下各位这个问题可能会出在哪儿?
另外大家那儿有没有表达效率较高的 EGFP上游含T7启动子的真核表达质粒?多谢多谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

我勒个去,原来是挖坟帖
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-05-23 03:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

woshijinzhen

新虫 (初入文坛)

我们用的是pcDNA3.1,可以表达
2楼2015-05-22 22:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

确定eGFP基因的N端有Kozak序列吗?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2015-05-23 03:20:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Summersing

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by WMQ青風軒 at 2021-04-24 15:51:49
请问解决了么?

这么多年了,我都忘了曾经问过这么个问题。。
6楼2021-09-03 17:04:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +3 谷雨上岸 2026-03-23 4/200 2026-03-23 15:53 by ACS Nano——
[考研] 284求调剂 +6 Zhao anqi 2026-03-22 6/300 2026-03-23 09:23 by king123!
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见