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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 在amp平板中的菌落，37℃放久了，会不会影响活性？
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87115wh

木虫 (小有名气)

七吃喀嚓

[求助] 在amp平板中的菌落，37℃放久了，会不会影响活性？ 已有3人参与

重组质粒转化入DH5α后，涂amp的板子，挑取了单菌落，通过pcr以及双酶切鉴定发现是假阳性，之后在37℃放了3天后又挑取了单菌落，但是在加了amp的LB液体中基本没长，连续挑取了好几次都没长，但是第一次挑取的时候可以在LB液体中生长。请问各位，是由于在37℃放的太久，导致单克隆活性降低从而不长，还是其他原因呢？敬请赐教，越详细越好~
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老妹，你说这是为什么呢
1楼 2014-07-02 11:28:11
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pudding9696

无虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币-10, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 广告 2014-07-04 15:24:18
本帖内容被屏蔽
4楼2014-07-04 14:24:33
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zhifangli

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-04 11:36:49
87115wh: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-04 12:23:06
氨苄是一个很容易失活的抗生素，越高温失效越快，LZ在37°放了三天，长出来的肯定就是假阳性了。第一次长出来的还有一定比例的假阳性，何况又放了三天37度。如果，做T-easy 克隆，建议选用携带有卡纳的抗生素。
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2楼2014-07-04 11:34:29
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87115wh

木虫 (小有名气)

七吃喀嚓
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhifangli at 2014-07-04 11:34:29
氨苄是一个很容易失活的抗生素，越高温失效越快，LZ在37°放了三天，长出来的肯定就是假阳性了。第一次长出来的还有一定比例的假阳性，何况又放了三天37度。如果，做T-easy 克隆，建议选用携带有卡纳的抗生素。

可能是这样，昨天又重新涂了板子挑了单克隆，今天果然长了，kankanpcr结果吧~
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老妹，你说这是为什么呢
3楼2014-07-04 12:23:04
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hl5210

新虫 (初入文坛)
我好奇的是，为什么37摄氏度放了3天没有长？？我会放在冰箱4摄氏度，但是还会长，只是慢一些
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5楼2014-07-22 16:37:54
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