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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 硫酸铵对木聚糖酶酶活有影响么？
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宫晓

银虫 (初入文坛)

[求助] 硫酸铵对木聚糖酶酶活有影响么？ 已有2人参与

我经过固体发酵制的粗酶液（木聚糖酶），经过70%硫酸铵盐析（要沉淀，溶于PBS缓冲液中）后，用DNS法检测木聚糖酶基本测不出酶活，然而稀释10倍后确有很高的酶活。同时，我用20%的硫酸铵盐析（要上清液）后，出现同样的问题。求高手指教。
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小小猪
1楼 2014-07-02 10:09:52
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有多高酶活，固体发酵的，酶类可能复杂，不是纯的木聚糖酶
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4楼2015-06-17 14:41:32
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
宫晓: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-08-14 14:31:31
你用PBS缓冲液，那么你的酶可能是在接近中性的pH范围内酶活高，硫酸铵是一种酸性的盐，如果缓冲液缓冲能力不太够的话，高浓度的硫酸铵可能会使缓冲液的pH下降的。稀释以后，可能是pH又回到原来的范围了。
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2楼2014-08-11 20:23:37
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宫晓

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-08-11 20:23:37
你用PBS缓冲液，那么你的酶可能是在接近中性的pH范围内酶活高，硫酸铵是一种酸性的盐，如果缓冲液缓冲能力不太够的话，高浓度的硫酸铵可能会使缓冲液的pH下降的。稀释以后，可能是pH又回到原来的范围了。

我后来查了下，发现是硫酸铵中的铵根离子对DNS法测还原糖有干扰作用，所以在加入DNS后要加入适量的氢氧化钠溶液排除铵根离子的干扰。这样就又酶活了。仍要谢谢您的答复。
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小小猪
3楼2014-08-14 14:31:21
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谦虚求解

铜虫 (小有名气)
你好，我向询问一下您关于测定酶活使用的木聚糖底物是哪个型号？
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5楼2018-05-06 22:49:59
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