24小时热门版块排行榜    

查看: 1352  |  回复: 4

宫晓

银虫 (初入文坛)

[求助] 硫酸铵对木聚糖酶酶活有影响么? 已有2人参与

我经过固体发酵制的粗酶液(木聚糖酶),经过70%硫酸铵盐析(要沉淀,溶于PBS缓冲液中)后,用DNS法检测木聚糖酶基本测不出酶活,然而稀释10倍后确有很高的酶活。同时,我用20%的硫酸铵盐析(要上清液)后,出现同样的问题。求高手指教。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

小小猪
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
宫晓: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-08-14 14:31:31
你用PBS缓冲液,那么你的酶可能是在接近中性的pH范围内酶活高,硫酸铵是一种酸性的盐,如果缓冲液缓冲能力不太够的话,高浓度的硫酸铵可能会使缓冲液的pH下降的。稀释以后,可能是pH又回到原来的范围了。
2楼2014-08-11 20:23:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宫晓

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-08-11 20:23:37
你用PBS缓冲液,那么你的酶可能是在接近中性的pH范围内酶活高,硫酸铵是一种酸性的盐,如果缓冲液缓冲能力不太够的话,高浓度的硫酸铵可能会使缓冲液的pH下降的。稀释以后,可能是pH又回到原来的范围了。

我后来查了下,发现是硫酸铵中的铵根离子对DNS法测还原糖有干扰作用,所以在加入DNS后要加入适量的氢氧化钠溶液排除铵根离子的干扰。这样就又酶活了。仍要谢谢您的答复。
小小猪
3楼2014-08-14 14:31:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有多高酶活,固体发酵的,酶类可能复杂,不是纯的木聚糖酶
4楼2015-06-17 14:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谦虚求解

铜虫 (小有名气)

你好,我向询问一下您关于测定酶活使用的木聚糖底物是哪个型号?
5楼2018-05-06 22:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 宫晓 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 09:49 by G6APbkg8SA6w
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 09:39 by G6APbkg8SA6w
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-29 09:17 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 05:45 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
请填处理意见