应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 19299  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三爷111

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 落雪无痕725 at 2015-02-03 11:23:27
你好，小弟最近也想做BMM诱导实验，首先感谢你的protocol，有个问题想咨询一下，就是你们把分离出来的骨髓细胞在培养皿中诱导成功后，再如何分离出来，好像单核巨噬细胞贴壁很牢，不容易消化下来，如果诱导好了之后 ...

我们是用胰酶消化的，胰酶消化一两分钟之后，再加含有血清的培养基终止消化就可以了。
赞一下 回复此楼
11楼2015-02-03 19:19:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

庸医的手术刀

新虫 (初入文坛)
不知道楼主的问题解决没有   我的细胞培养结果和您的一样  希望能分享经验
赞一下 回复此楼
12楼2015-03-29 10:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三爷111

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 落雪无痕725 at 2015-02-03 11:23:27
你好，小弟最近也想做BMM诱导实验，首先感谢你的protocol，有个问题想咨询一下，就是你们把分离出来的骨髓细胞在培养皿中诱导成功后，再如何分离出来，好像单核巨噬细胞贴壁很牢，不容易消化下来，如果诱导好了之后 ...

就用胰酶消化个一两分钟就可以了
赞一下 回复此楼
13楼2015-04-02 09:45:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cordeliawrx

木虫 (小有名气)
楼主你好，现在你还养BMDM吗？我刚开始养，实验室之前也没人养过，完全自己摸索，养出的细胞也是这个样子。这是正常的吗？状态好的BMDM应该是什么样子的啊？可以分享一张图看吗？非常感谢！
赞一下 回复此楼
14楼2015-12-08 17:53:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三爷111

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by cordeliawrx at 2015-12-08 17:53:44
楼主你好，现在你还养BMDM吗？我刚开始养，实验室之前也没人养过，完全自己摸索，养出的细胞也是这个样子。这是正常的吗？状态好的BMDM应该是什么样子的啊？可以分享一张图看吗？非常感谢！

最近没有再养了，你可以自己摸索着看一下，我觉得细胞养到第四天是状态最好的。你可以取养到第四天的细胞消化下来，测个流式看看F4/80的表达。
赞一下 回复此楼
15楼2015-12-09 10:27:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ChangeJ

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by cordeliawrx at 2015-12-08 17:53:44
楼主你好，现在你还养BMDM吗？我刚开始养，实验室之前也没人养过，完全自己摸索，养出的细胞也是这个样子。这是正常的吗？状态好的BMDM应该是什么样子的啊？可以分享一张图看吗？非常感谢！

我一直在养BMDM
图中的细胞一看就是培养的时间太久了，cell confluence 太低，这样已经不好用了。
我们用100ng/mL M-CSF 在 RPMI-1640（5% Pen/Step, 10% FBS)里培养。
第一天算Day0，Day3天添加培养基100ng/mL M-CSF（不换RPMI）
第五天confluence在80%-90% 就可以使用了。
跑过FACS 这时候97%的贴壁细胞都是F4/80+CD11b+
第三天的时候是80%左右。
到第七天有99%以上的细胞都是F4/80+CD11b+,但是这时候细胞数量已经下降的很厉害了。
赞一下(7人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

三爷111
16楼2016-03-22 01:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三爷111

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by ChangeJ at 2016-03-22 01:28:42
我一直在养BMDM
图中的细胞一看就是培养的时间太久了，cell confluence 太低，这样已经不好用了。
我们用100ng/mL M-CSF 在 RPMI-1640（5% Pen/Step, 10% FBS)里培养。
第一天算Day0，Day3天添加培养基100ng/mL ...

谢谢，想问下您是在培养皿还是培养瓶里诱导的啊？取下来的BM细胞以多少细胞每毫升来培养的？培养结束后要使用的话，是用胰酶消化的吗？我之前也养到过4天就用，4天的时候细胞状态还不错，但是用胰酶消化下来的细胞再铺板培养的话，细胞状态又不好了。期待您的回复，谢谢！
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2016-03-22 15:12:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangshiqiu8

新虫 (小有名气)
马克
回复此楼
秋爷，风一样的男人！
18楼2018-09-27 10:50:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好研究

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 青云瀚海 at 2014-09-15 16:40:01
我们实验室诱导BMDM是这样诱导的：
1、引颈处死小鼠，将小鼠后肢的皮毛剥置足部，连同褪下的皮毛剪去足部，剪下后腿，放入盛有无菌PBS的培养皿中
2、镊子夹住腿骨一端后，用剪刀剔除肌肉，在关节处剪断腿骨
3、  ...

请问您遇到过细胞贴壁后，培养了几天就基本上死掉的情况吗？求回复，跪求
赞一下 回复此楼
19楼2019-02-25 17:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (初入文坛)
本帖仅楼主可见
赞一下
20楼2019-02-28 15:42:14
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 三爷111 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 330分求调剂 +4 qzenlc 2026-03-29 4/200 2026-03-29 07:09 by wxiongid
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +10 Mr. Z 2026-03-25 10/500 2026-03-29 00:34 by 我是小康
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:32 by 544594351
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 083000学硕274求调剂 +8 Li李鱼 2026-03-26 8/400 2026-03-28 20:33 by 加油向未来啊
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +9 lin0039 2026-03-26 9/450 2026-03-28 13:05 by 唐沐儿
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 一志愿上海理工能源动力（085800）310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭