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三爷111

金虫 (小有名气)

[求助] 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。 已有2人参与

最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞,冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后,取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天,中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡,不知道是怎么会事,是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢?求高人指教啊!

关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
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三爷111

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by cordeliawrx at 2015-12-08 17:53:44
楼主你好,现在你还养BMDM吗?我刚开始养,实验室之前也没人养过,完全自己摸索,养出的细胞也是这个样子。这是正常的吗?状态好的BMDM应该是什么样子的啊?可以分享一张图看吗?非常感谢!

最近没有再养了,你可以自己摸索着看一下,我觉得细胞养到第四天是状态最好的。你可以取养到第四天的细胞消化下来,测个流式看看F4/80的表达。
15楼2015-12-09 10:27:28
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞老了。营养过剩。个人观点。
2楼2014-07-01 13:21:01
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三爷111

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-07-01 13:21:01
细胞老了。营养过剩。个人观点。

那你培养过这种细胞吗?这是要用细胞因子从祖细胞诱导分化过来的,必须要诱导到6-7天的样子。你有什么改进的建议吗?
3楼2014-07-01 15:12:46
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

★
三爷111: 金币+1, 基本没有帮助 2014-07-01 21:15:36
这个改进我还真讲不出,按步骤做就挺好。
4楼2014-07-01 16:19:04
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