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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
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三爷111

金虫 (小有名气)

[求助] 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。 已有2人参与

最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞，冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后，取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天，中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡，不知道是怎么会事，是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢？求高人指教啊！

关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
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1楼 2014-07-01 11:48:12
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ChangeJ

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by cordeliawrx at 2015-12-08 17:53:44
楼主你好，现在你还养BMDM吗？我刚开始养，实验室之前也没人养过，完全自己摸索，养出的细胞也是这个样子。这是正常的吗？状态好的BMDM应该是什么样子的啊？可以分享一张图看吗？非常感谢！

我一直在养BMDM
图中的细胞一看就是培养的时间太久了，cell confluence 太低，这样已经不好用了。
我们用100ng/mL M-CSF 在 RPMI-1640（5% Pen/Step, 10% FBS)里培养。
第一天算Day0，Day3天添加培养基100ng/mL M-CSF（不换RPMI）
第五天confluence在80%-90% 就可以使用了。
跑过FACS 这时候97%的贴壁细胞都是F4/80+CD11b+
第三天的时候是80%左右。
到第七天有99%以上的细胞都是F4/80+CD11b+,但是这时候细胞数量已经下降的很厉害了。
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三爷111
16楼2016-03-22 01:28:42
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞老了。营养过剩。个人观点。
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2楼2014-07-01 13:21:01
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三爷111

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-07-01 13:21:01
细胞老了。营养过剩。个人观点。

那你培养过这种细胞吗？这是要用细胞因子从祖细胞诱导分化过来的，必须要诱导到6-7天的样子。你有什么改进的建议吗？
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3楼2014-07-01 15:12:46
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
三爷111: 金币+1, 基本没有帮助 2014-07-01 21:15:36
这个改进我还真讲不出，按步骤做就挺好。
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4楼2014-07-01 16:19:04
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