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三爷111

金虫 (小有名气)

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专业: 自身免疫性疾病

[求助] 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。已有2人参与

最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞，冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后，取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天，中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡，不知道是怎么会事，是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢？求高人指教啊！

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巨噬细胞实验

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1楼 2014-07-01 11:48:12

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落雪无痕725

银虫 (初入文坛)

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性别: GG
专业: 寄生虫、寄生虫感染与宿主

引用回帖:

6楼: Originally posted by 青云瀚海 at 2014-09-15 16:40:01
我们实验室诱导BMDM是这样诱导的：
1、引颈处死小鼠，将小鼠后肢的皮毛剥置足部，连同褪下的皮毛剪去足部，剪下后腿，放入盛有无菌PBS的培养皿中
2、镊子夹住腿骨一端后，用剪刀剔除肌肉，在关节处剪断腿骨
3、 ...

你好，小弟最近也想做BMM诱导实验，首先感谢你的protocol，有个问题想咨询一下，就是你们把分离出来的骨髓细胞在培养皿中诱导成功后，再如何分离出来，好像单核巨噬细胞贴壁很牢，不容易消化下来，如果诱导好了之后我想用它来做其他实验，或者流式检测，怎样才能最大可能的吧贴壁的巨噬细胞消化下来。小弟新手一枚，望不吝赐教！