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三爷111金虫 (小有名气)
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[求助]
关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。 已有2人参与
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最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞,冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后,取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天,中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡,不知道是怎么会事,是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢?求高人指教啊! R3CKDF[`}]OK{Z{@QG3[0T2.jpg |
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【答案】应助回帖
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三爷111: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-09-16 09:41:50
三爷111: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-09-16 09:41:50
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我们实验室诱导BMDM是这样诱导的: 1、引颈处死小鼠,将小鼠后肢的皮毛剥置足部,连同褪下的皮毛剪去足部,剪下后腿,放入盛有无菌PBS的培养皿中 2、镊子夹住腿骨一端后,用剪刀剔除肌肉,在关节处剪断腿骨 3、 用2mL注射器吸取无血清的1640培养基,将针头刺入骨髓腔,反复冲洗骨髓至骨髓变白,将骨髓冲洗液加入到50mL离心管中,1000rpm离心5min 4、将离心得到的骨髓细胞用10mL含MCSF(50ng/mL)和血清的1640培养基重悬,然后分装到两个25cm2的细胞培养瓶中,置于37℃和5%CO2气体浓度适度的培养箱中培养3天 5、弃上清,换5mL含MCSF(50ng/mL)和血清的1640培养基继续培养4天 |

6楼2014-09-15 16:40:01
yipan
铜虫 (职业作家)
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2楼2014-07-01 13:21:01
三爷111
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3楼2014-07-01 15:12:46
yipan
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4楼2014-07-01 16:19:04













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三爷111