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三爷111

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[求助] 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。已有2人参与

最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞，冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后，取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天，中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡，不知道是怎么会事，是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢？求高人指教啊！

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巨噬细胞实验

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1楼 2014-07-01 11:48:12

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三爷111

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送红花一朵

引用回帖:

6楼: Originally posted by 青云瀚海 at 2014-09-15 16:40:01
我们实验室诱导BMDM是这样诱导的：
1、引颈处死小鼠，将小鼠后肢的皮毛剥置足部，连同褪下的皮毛剪去足部，剪下后腿，放入盛有无菌PBS的培养皿中
2、镊子夹住腿骨一端后，用剪刀剔除肌肉，在关节处剪断腿骨
3、 ...

非常感谢您的回答，我还想再问一下，你们实验室取下来的骨髓细胞不用贴壁2h-4h之后弃掉贴壁的细胞，收集上清里的细胞这一步吗？是一只老鼠的两条腿的骨髓细胞分成两个培养瓶培养，还是一条腿的骨髓细胞分成两个瓶培养？另外，你们养出来的BMDM细胞状态好吗？阳性率有多少？非常期待您的答复，谢谢啦。