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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
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三爷111

金虫 (小有名气)

[求助] 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。 已有2人参与

最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞，冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后，取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天，中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡，不知道是怎么会事，是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢？求高人指教啊！

关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
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巨噬细胞实验

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1楼 2014-07-01 11:48:12
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三爷111

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 青云瀚海 at 2014-09-15 16:40:01
我们实验室诱导BMDM是这样诱导的：
1、引颈处死小鼠，将小鼠后肢的皮毛剥置足部，连同褪下的皮毛剪去足部，剪下后腿，放入盛有无菌PBS的培养皿中
2、镊子夹住腿骨一端后，用剪刀剔除肌肉，在关节处剪断腿骨
3、  ...

非常感谢您的回答，我还想再问一下，你们实验室取下来的骨髓细胞不用贴壁2h-4h之后弃掉贴壁的细胞，收集上清里的细胞这一步吗？是一只老鼠的两条腿的骨髓细胞分成两个培养瓶培养，还是一条腿的骨髓细胞分成两个瓶培养？另外，你们养出来的BMDM细胞状态好吗？阳性率有多少？非常期待您的答复，谢谢啦。
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7楼2014-09-16 09:41:39
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞老了。营养过剩。个人观点。
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2楼2014-07-01 13:21:01
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三爷111

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-07-01 13:21:01
细胞老了。营养过剩。个人观点。

那你培养过这种细胞吗？这是要用细胞因子从祖细胞诱导分化过来的，必须要诱导到6-7天的样子。你有什么改进的建议吗？
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3楼2014-07-01 15:12:46
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
三爷111: 金币+1, 基本没有帮助 2014-07-01 21:15:36
这个改进我还真讲不出，按步骤做就挺好。
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4楼2014-07-01 16:19:04
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