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libingbeth

新虫 (小有名气)

[求助] Hypersep C18柱子的前处理问题 已有3人参与

是这样的
Rhizosphere samples (approximately 3 g RFW) were ultrasonically extracted in 30 ml of 9:1 acetonitrile:water containing 0.1%
trifluoroacetic acid. After 10 min of ultrasonic agitation, extracts
were 11mm filtered (Qualitative Paper Grade 1, Whatman, UK),
evaporated with dry nitrogen, redissolved in 3 ml of methanol, and
0.2mm filtered (Millex-GN, Millipore, USA). SPE packings with
different pore sizes and bonded silica or polymeric particles were
evaluated. Because of the hydrophilic–hydrophobic nature of the
analytes, the SPE columns worked best when chosen to maximize
retention of impurities. Using SPE columns of octadecyl unendcapped bonded silica with an average pore size of 60 Å (HypoSep
C18, Thermo-Electron, USA), both surfactin and iturin A were eluted
with methanol, then evaporated dry, redissolved in 0.5 ml of methanol, and refiltered (0.2mm) for subsequent HPLC injection
and analyses.
我现在已经做到了把样品溶于3ml的甲醇中。然后买了Hyposep C18的柱子,但是不明白这个方法里说的“The SPEcolumns works best when chosen to maximize retention of impurities” 是什么意思。我现在应该怎么前处理柱子呢,样品本来就溶解在甲醇中,还说从SPE柱子上面用甲醇洗脱,求高手示下。
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sepax-Dr.G

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
你要了解清楚SPE的原理就知道了,和色谱柱的原理是相同的,首先你用正压货负压把液体过来柱子,因为吸附作用必然会留有物质在小柱子上,要选择不同的淋洗剂把物质洗脱下去达到分离的效果
我宁愿被雨打风吹日晒,被大漠风沙伤害,把心暴露在阳光下对你表白
2楼2014-06-24 10:41:12
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libingbeth

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sepax-Dr.G at 2014-06-24 10:41:12
你要了解清楚SPE的原理就知道了,和色谱柱的原理是相同的,首先你用正压货负压把液体过来柱子,因为吸附作用必然会留有物质在小柱子上,要选择不同的淋洗剂把物质洗脱下去达到分离的效果

那这个方法的意思是不是不用活化柱子,直接过样品,同样用甲醇去洗脱,但是方法中说的最大程度的保留杂志,这句话就不懂了
3楼2014-06-24 10:55:23
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libingbeth

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sepax-Dr.G at 2014-06-24 10:41:12
你要了解清楚SPE的原理就知道了,和色谱柱的原理是相同的,首先你用正压货负压把液体过来柱子,因为吸附作用必然会留有物质在小柱子上,要选择不同的淋洗剂把物质洗脱下去达到分离的效果

因为在过柱子之前的样品就溶解在甲醇里了,还要用甲醇去洗,这个怎么分离呢
4楼2014-06-24 10:57:03
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轩辕义

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
The SPEcolumns works best when chosen to maximize retention of impurities这句话的意思就是当杂质在spe小柱上保留最大时(当然是选择最好的条件),spe工作效率最好?
小柱肯定是要活化的,你的样品不能溶解在甲醇中啊(既然甲醇可以洗脱出来,你的样品溶解在甲醇中。肯定spe不会吸附),可以尝试溶解在水中
5楼2014-06-26 09:20:06
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这就是传说中的穿透现象,你可以使用乙腈或者甲醇和水的比例来增加极性,增加保留
6楼2014-06-26 13:58:16
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