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xiaogongji

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 病毒转染细胞求救 已有1人参与

本人用慢病毒(携带GFP)转染细胞后,植入到脊髓损伤的动物体内,现有问题请教大家
术后4w,我想观察移植入体内细胞存活情况,请问:
是取出脊髓直接冰冻切片,观察荧光的表达;还是先心脏灌注,然后再取出脊髓,进行冰冻切片观察
因为直接取出脊髓担心太软,不好取出,但是先灌注,又担心看不到荧光,
求救大家
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xyqlllfe

新虫 (初入文坛)

请问您的慢病毒是自己拯救的吗
3楼2014-09-02 09:05:57
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xiangyu9356

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该先灌注,灌注只是把血管中的血液完全洗去,对组织的影响较小。如果你植入的细胞能在损伤处存活的话,应该是与体内原有的组织融合在一起了,应该不能被洗掉的。
另:如果做冰冻切片的话建议组织取出后尽快做,最好不要存于-80或液氮(GFP的冷淬灭很严重)。
祝好!
满堂花醉三千客,更无一人是知音。
2楼2014-06-17 10:05:48
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