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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DGGE切割下来的胶用带GC夹子的引物做克隆测序可以吗？--急！
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qwd4083

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE切割下来的胶用带GC夹子的引物做克隆测序可以吗？--急！ 已有2人参与

DGGE切割下来的胶用带GC夹子的引物做克隆测序可以吗？--急！会影响T-A克隆吗？按理说本来应该用不带GC夹子的引物扩展，然后纯化后做克隆的，但是我扩增了很多次（期间包括换引物，换程序，还有MIX等），后来用带GC夹子的就能扩增出条带，我想能不能用这个做克隆？会有影响吗？为什么文献中都是用不带夹子的呢？道理在哪里？请高人指点，感激不尽！
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1楼 2014-06-12 16:37:25
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zhongzhen

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-23 08:29:43
我试过用带GC夹子的克隆子送去测序，双向测序，
后来好像只测出一个方向的，不过序列短一个方向也可以了，
但是还是不建议咯，文献没有带GC的肯定有它的道理
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2楼2015-03-22 17:13:31
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老脸挂不住

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-23 08:29:48
不知道，但不建议用带gc夹子的引物产物送去测序，一般都会选择不带gc夹，带有gc夹子的测出来也没什么用，净添麻烦，不带gc夹结果不好吗
赞一下 回复此楼
我要这天，再遮不住我眼要这地，再埋不了我心要这众生，都明白我意要那诸佛，都烟消云散
3楼2015-03-22 19:51:17
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