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qwd4083

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE切割下来的胶用带GC夹子的引物做克隆测序可以吗?--急! 已有2人参与

DGGE切割下来的胶用带GC夹子的引物做克隆测序可以吗?--急!会影响T-A克隆吗?按理说本来应该用不带GC夹子的引物扩展,然后纯化后做克隆的,但是我扩增了很多次(期间包括换引物,换程序,还有MIX等),后来用带GC夹子的就能扩增出条带,我想能不能用这个做克隆?会有影响吗?为什么文献中都是用不带夹子的呢?道理在哪里?请高人指点,感激不尽!
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zhongzhen

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-23 08:29:43
我试过用带GC夹子的克隆子送去测序,双向测序,
后来好像只测出一个方向的,不过序列短一个方向也可以了,
但是还是不建议咯,文献没有带GC的肯定有它的道理
2楼2015-03-22 17:13:31
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老脸挂不住

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-23 08:29:48
不知道,但不建议用带gc夹子的引物产物送去测序,一般都会选择不带gc夹,带有gc夹子的测出来也没什么用,净添麻烦,不带gc夹结果不好吗
我要这天,再遮不住我眼要这地,再埋不了我心要这众生,都明白我意要那诸佛,都烟消云散
3楼2015-03-22 19:51:17
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