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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » DNA熔点测试实验
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miranda2013

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA熔点测试实验 已有3人参与

各位虫友：
看到药物与DNA相互作用的文献中有测DNA熔点的实验，
1、请问DNA熔点测试实验该怎么做，才能像文献中那样做的数据结果很漂亮（如下图）。我自己想到的方法是将DNA溶液一直加热，每隔一定温度取液测量紫外吸收。但是这样做出的结果很不好。
1、请问DNA熔点测试实验，是有专门的仪器测量吗？仪器叫什么名称？

DNA熔点测试实验
图片1.png
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1楼 2014-06-11 09:15:50
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miranda2013

铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sweet-grape at 2014-06-13 18:12:25
用圆二色测的话应该只需设置起始波长范围和温度范围，还有要监测的DNA的特征峰，然后设好每隔几度采集一次光谱，最后就会出来一条溶解曲线，其实就是那个特征峰的强度随温度变化的曲线...

谢谢虫友不吝相助！
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8楼2014-06-13 19:17:20
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hy519772062

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
miranda2013(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-06-12 12:59:51
miranda2013: 金币+5, ★有帮助 2014-06-13 13:05:41
熔解曲线么，不是sybr green。荧光定量PCR仪就行
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2楼2014-06-12 11:04:35
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sweet-grape

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
miranda2013: 金币+5, ★有帮助 2014-06-13 13:06:00
miranda2013: 金币+5 2014-06-13 13:16:04
其实紫外可见分光光谱仪和圆二色光谱仪都可以测熔点的，仪器上连个温控的装置，缓慢升温，每隔1~2℃采集一次光谱就行。文献中也有用FRET的方法，不过这个就相对麻烦一下，要用两端连着荧光基团的DNA。
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3楼2014-06-13 09:06:30
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miranda2013

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sweet-grape at 2014-06-13 09:06:30
其实紫外可见分光光谱仪和圆二色光谱仪都可以测熔点的，仪器上连个温控的装置，缓慢升温，每隔1~2℃采集一次光谱就行。文献中也有用FRET的方法，不过这个就相对麻烦一下，要用两端连着荧光基团的DNA。

非常感谢！有很大帮助！
再请问圆二色测熔点是设置哪些参数呢，测负椭圆率可以吗？我们用圆二色仪每次只测定了正负椭圆峰，其他的都还没尝试过。还请虫友多多帮助！
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4楼2014-06-13 13:16:12
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