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miranda2013铁虫 (小有名气)
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DNA熔点测试实验 已有3人参与
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各位虫友: 看到药物与DNA相互作用的文献中有测DNA熔点的实验, 1、请问DNA熔点测试实验该怎么做,才能像文献中那样做的数据结果很漂亮(如下图)。我自己想到的方法是将DNA溶液一直加热,每隔一定温度取液测量紫外吸收。但是这样做出的结果很不好。 1、请问DNA熔点测试实验,是有专门的仪器测量吗?仪器叫什么名称? 图片1.png |
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hy519772062
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-13 19:25:40
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-13 19:25:40
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用圆二色测的话应该只需设置起始波长范围和温度范围,还有要监测的DNA的特征峰,然后设好每隔几度采集一次光谱,最后就会出来一条溶解曲线,其实就是那个特征峰的强度随温度变化的曲线 |
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6楼2014-06-13 18:12:25
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| 前辈好,我最近在做用紫外测定ctDNA的Tm实验,以测定小分子和DNA的相互作用方式及结合力强弱。但之前没有做过,只看了一些文献,这个实验是要升温的(50-98度),紫外有温度探头伸到比色皿内部,请问是不是要用特定的比色皿,这样的话才不会在加热升温过程中有溶剂挥发(我用的溶剂是10mMPBS的水溶液),我现在用的是安捷伦的Cary 3500紫外分光光度计,比色皿部件号是5062-2496),相关链接https://www.agilent.com/zh-cn/pr ... -uv-vis-nir-systems?请问这种比色皿是否可以直接用来测Tm,还是说要专用的比色皿,非常感谢 |
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| 前辈好,我最近在做用紫外测定ctDNA的Tm实验,以测定小分子和DNA的相互作用方式及结合力强弱。但之前没有做过,只看了一些文献,这个实验是要升温的(50-98度),紫外有温度探头伸到比色皿内部,请问是不是要用特定的比色皿,这样的话才不会在加热升温过程中有溶剂挥发(我用的溶剂是10mMPBS的水溶液),我现在用的是安捷伦的Cary 3500紫外分光光度计,比色皿部件号是5062-2496),相关链接https://www.agilent.com/zh-cn/pr ... -uv-vis-nir-systems?请问这种比色皿是否可以直接用来测Tm,还是说要专用的比色皿,非常感谢 |
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