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cai609231608

新虫 (初入文坛)

[求助] 金黄色葡萄球菌的生长曲线已有1人参与

如何金黄色葡萄球菌的生长曲线?????
请问有详细步骤吗?
我是刚开始做实验,急求大家哦。。谢谢
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xiaoamuchong

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【答案】应助回帖

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cai609231608: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-06-08 21:12:30
cai609231608: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-09 00:02:48
1、制备培养基:使用LB培养基——胰蛋白胨 10g/L,NaCl 10g/L,酵母膏 5g/L,配500ml,121度灭菌20分钟。
2、同时灭菌牙签、枪头、空三角瓶(250ml的)、封口膜备用。
3、在超净台里将灭菌好的培养基分装到灭菌过的三角瓶中,每瓶100ml。
4、在超净台里用灭菌过的牙签挑取少量菌种(可能是从平板上、试管里、或者EP管里),然后用镊子夹着在三角瓶的培养基里涮涮,一共做同样的5个瓶子。
5、在超净台里用封口膜封好三角瓶,放置到37度摇床培养,同时开始计时。
6、每1小时拿出三角瓶,在超净台里打开,用移液器抽0.5ml,打入分光光度计的比色皿中,加0.5ml去离子水,以去离子水为空白对照,640nm比色,记录数据。5个瓶子都做一遍。
7、继续步骤6,直至OD值下降5-6小时后,停止实验。
8、按时间——OD值绘图,得到生长曲线。

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  • 附件 1 : 金黄色葡萄球菌血清5型生长曲线的测定.pdf
  • 2014-06-08 19:24:07, 212.33 K
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
2楼2014-06-08 19:24:08
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cai609231608

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-06-08 19:24:08
1、制备培养基:使用LB培养基——胰蛋白胨 10g/L,NaCl 10g/L,酵母膏 5g/L,配500ml,121度灭菌20分钟。
2、同时灭菌牙签、枪头、空三角瓶(250ml的)、封口膜备用。
3、在超净台里将灭菌好的培养基分装到灭菌过 ...

在挑菌的过程中是挑一个菌还是几个对照。。
如果挑了好几个菌那应该每个菌都是隔一个小时拿出来测OD吗?为什么等到oD降低就停止呢?。。。
我想是不是应该把同一个菌分成不同的时间段,如4,6,8,12.。。这样的时间段来测OD值呢?
3楼2014-06-08 20:41:39
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

引用回帖:
3楼: Originally posted by cai609231608 at 2014-06-08 20:41:39
在挑菌的过程中是挑一个菌还是几个对照。。
如果挑了好几个菌那应该每个菌都是隔一个小时拿出来测OD吗?为什么等到oD降低就停止呢?。。。
我想是不是应该把同一个菌分成不同的时间段,如4,6,8,12.。。这样的时间 ...

挑一个。OD降低就进入衰亡期了。接下去没有必要测了。同一个菌分装的。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
4楼2014-06-08 21:51:38
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cai609231608

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-06-08 21:51:38
挑一个。OD降低就进入衰亡期了。接下去没有必要测了。同一个菌分装的。...

哦。。好的。。谢谢。。你哦
生长曲线得到。。。还能做标准曲线是吗?
5楼2014-06-08 22:44:34
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阿钰么么

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-06-08 21:51:38
挑一个。OD降低就进入衰亡期了。接下去没有必要测了。同一个菌分装的。...

你好,我想知道那个细菌到了衰亡期的话仍然也就是部分细菌开始死亡,这个时候吸光度会降低吗?死了的细菌不会有吸收吗?

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-01-04 08:27:52
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