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xinr2010

金虫 (小有名气)

[求助] 求助,流感嗜血杆菌怎么培养啊?!!已有5人参与

小弟要开始做流感嗜血杆菌了,培养了近一周,还没培养出来,郁闷啊!!!
不想死在第一关,连菌都没出来,多郁闷啊,还请各位哥哥姐姐帮帮忙,教小弟把菌培出来。。。。。。

我看文献说固体培养基要用CO2,所以选择了液体培养基,用的是sBHI,将BHI121度高压15min,再加入事先配好的hemin溶液及NAD溶液,再接菌。

菌摇了一天没出来,问题如下:
1 sBHI中添加的hemin和NAD浓度到底分别多少,这两种物质溶液该如何配置?
2 摇这种菌需要多长时间啊?
3 固体培养不用CO2,可以么?
4 除了sBHI外,还有没有其他方法液体培养这种菌?

谢谢了
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huangjizheng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-02-16 21:41:34
用固体血培养基和巧克力平板吧
http://so.360.cn/s?q=流感嗜血杆菌培养&pq=流感嗜血杆菌peiyang&src=srp&fr=haoxzq
好好学习,天天向上~!
2楼2014-02-14 11:25:21
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阳光氧气清水

银虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xinr2010: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 谢谢了! 2014-03-12 17:56:40
xinr2010: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 谢谢了! 2014-03-12 17:56:52
培养基配制:以国产MH琼脂为基础,加入0.6%胰蛋白胨,1%酵母粉,0.25%水溶性淀粉,0.15%枸橼酸钠,溶于1L蒸馏水中,高压灭菌10磅(115℃)15~20分钟,冷却至80℃加脱纤维羊血制成巧克力琼脂,冷至50℃再加入0.2%(10μg/ml)万古霉素,制成平板。
6楼2014-02-18 15:42:38
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lddmc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xinr2010: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2014-03-12 17:56:16
最好用巧克力平板培养,放在烛缸里应该24小时就能长出来。
7楼2014-02-20 16:23:13
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狙梦

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xinr2010 at 2014-03-12 17:55:29
谢谢大家帮助我,不知道应该把金币给谁啊?

用巧克力平板,,然后烛缸培养。应为流感最适宜的二氧化碳浓度5%-10%刚好烛缸能达到,然后楼上说的巧克力平板营养也能满足,一般情况不用烛缸也能长。。不过长的不太好
安心学习
9楼2015-06-05 12:02:16
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普通回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个菌当然要用特定的培养基,你完全可以打电话给试剂公司,苛养菌有专门的培养基。
3楼2014-02-16 19:23:09
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skull123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huangjizheng at 2014-02-14 11:25:21
用固体血培养基和巧克力平板吧
http://so.360.cn/s?q=流感嗜血杆菌培养&pq=流感嗜血杆菌peiyang&src=srp&fr=haoxzq

这个是正解
4楼2014-02-17 00:23:16
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听歌的水滴

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xinr2010: 金币+24, ★★★★★最佳答案, 谢谢了! 2014-03-12 17:57:03
引用回帖:
4楼: Originally posted by skull123 at 2014-02-17 00:23:16
这个是正解...

流感嗜血杆菌需要X因子和V因子的存在在可以生长,常见的肉汤和普通的琼脂培养基以哥伦比亚血琼脂培养基不能生长,常见平板上以巧克力培养基进行生长(羊血处理特殊,X因子和V因子保留)。推荐使用CO2环境。
5楼2014-02-18 14:50:26
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xinr2010

金虫 (小有名气)

谢谢大家帮助我,不知道应该把金币给谁啊?
8楼2014-03-12 17:55:29
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toxicpeach

木虫 (正式写手)

请问楼主的菌分离出来了么?分出来之后怎么扩大培养啊?有没有合适的液体培养基来增菌呢?增菌条件如何?

发自小木虫Android客户端
海纳百川有容乃大,壁立千尺无欲则刚
10楼2017-12-02 23:38:44
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