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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助求助：红曲霉PDA液体培养计数 问题
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爱莉儿

新虫 (小有名气)

[求助] 求助求助：红曲霉PDA液体培养计数 问题

红曲霉在液体培养（用了恒温摇床）时，液体里会形成菌丝球，看到大家很多是通过测干重来对霉菌计数。
    我的问题是，我把红曲霉液体培养之后，还需要接种一部分到发酵培养基，如果接种体积里面不含菌丝球，那我采用干重计数，是不是不能反应 我的接种量呢？谢谢大家啦！
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1楼 2012-05-12 09:25:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

低调的夙愿

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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爱莉儿: 金币+5, ★有帮助 2012-05-14 20:28:39
你可以制成孢子悬液再接种。
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2楼2012-05-12 16:19:35
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普通回帖

microxy

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
爱莉儿: 金币+10 2012-05-14 20:29:02
爱莉儿: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 本来想对你下面那条评分的，不知道怎么评不了，就评这个吧！谢谢你送的鲜花哈！呵呵 2012-05-17 21:31:20
引用回帖:
2楼: Originally posted by 低调的夙愿 at 2012-05-12 16:19:35:
你可以制成孢子悬液再接种。

固体培养，制备孢子悬液！如不产孢，液体培养，瓶中加玻璃珠，增大剪切力，接种菌液。
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3楼2012-05-12 16:40:22
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爱莉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by microxy at 2012-05-12 16:40:22:
固体培养，制备孢子悬液！如不产孢，液体培养，瓶中加玻璃珠，增大剪切力，接种菌液。

那怎么对液体培养的菌液计数，并以此来反应我的接种量呢？
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4楼2012-05-12 19:26:30
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱莉儿 at 2012-05-12 19:26:30:
那怎么对液体培养的菌液计数，并以此来反应我的接种量呢？

霉菌的菌液不能计数的，因为里面的都是菌丝 长短不一互相交织，所以要按干重接种。一般以单位体积的干重接种，但是文献中较多的是利用孢子悬液接种的。
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5楼2012-05-12 20:29:37
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爱莉儿

新虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by microxy at 2012-05-12 20:29:37:
霉菌的菌液不能计数的，因为里面的都是菌丝 长短不一互相交织，所以要按干重接种。一般以单位体积的干重接种，但是文献中较多的是利用孢子悬液接种的。

是不是做固体发酵用孢子悬液接种，而液体发酵则要先液体培养霉菌呢？一般霉菌的干重大概是多少呢？谢谢哈！
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6楼2012-05-13 20:56:25
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launol123

禁虫 (初入文坛)
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7楼2012-05-13 22:04:32
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爱莉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by launol123 at 2012-05-13 22:04:32:
我也在做红曲霉，我也有相关问题想要请教，孢子悬液中浓度怎么看，镜检看孢子个数吗？另外，红曲霉斜面洗过孢子后，先进行种子液培养2d，再做发酵培养，要做红曲霉的生长曲线的话，是不是要控制接种的孢子数？假 ...

孢子悬液可以通过镜检看，也可以涂布计数；我觉得应该控制种子液接种到发酵液中孢子数，因为这是最终设计孢子变量的步骤。我想请问一下，红曲霉进行种子液体培养，怎么确定种子需要培养几天呢？
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8楼2012-05-14 08:42:45
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launol

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 爱莉儿 at 2012-05-14 08:42:45:
孢子悬液可以通过镜检看，也可以涂布计数；我觉得应该控制种子液接种到发酵液中孢子数，因为这是最终设计孢子变量的步骤。我想请问一下，红曲霉进行种子液体培养，怎么确定种子需要培养几天呢？

有的文献是两天，也有的3天，一天的，我做的2天。可是种子液中孢子数怎么控制？我在想，假如用同一瓶种子液接种的话，是不是就不存在控制孢子数的问题了？因为接种体积数都一样啊？
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9楼2012-05-17 00:55:10
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爱莉儿

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by launol at 2012-05-17 00:55:10:
有的文献是两天，也有的3天，一天的，我做的2天。可是种子液中孢子数怎么控制？我在想，假如用同一瓶种子液接种的话，是不是就不存在控制孢子数的问题了？因为接种体积数都一样啊？

可以把斜面上的孢子用无菌水（最好加点吐温）洗下来，然后计数，这样你每次取一定量的孢子液到种子液中，就可以知道种子液中初始孢子数量了。种子液也是液体培养，液体里面的孢子不好计数啊，因此我之前说“控制种子液接种到发酵液中孢子数”可能有点问题。可以按照初始接种孢子数到种子液中来定量，控制种子液接到发酵液中体积，以后每批都这样处理，应该就可以了吧。相互学习哈，不知道我说的是否清楚。
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武明空
10楼2012-05-17 14:24:44
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