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爱莉儿

新虫 (小有名气)

[求助] 求助求助:红曲霉PDA液体培养计数 问题

红曲霉在液体培养(用了恒温摇床)时,液体里会形成菌丝球,看到大家很多是通过测干重来对霉菌计数。
    我的问题是,我把红曲霉液体培养之后,还需要接种一部分到发酵培养基,如果接种体积里面不含菌丝球,那我采用干重计数,是不是不能反应 我的接种量呢?谢谢大家啦!
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爱莉儿

新虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by microxy at 2012-05-12 16:40:22:
固体培养,制备孢子悬液!如不产孢,液体培养,瓶中加玻璃珠,增大剪切力,接种菌液。

那怎么对液体培养的菌液计数,并以此来反应我的接种量呢?
4楼2012-05-12 19:26:30
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爱莉儿

新虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by microxy at 2012-05-12 20:29:37:
霉菌的菌液不能计数的,因为里面的都是菌丝 长短不一互相交织,所以要按干重接种。一般以单位体积的干重接种,但是文献中较多的是利用孢子悬液接种的。

是不是做固体发酵用孢子悬液接种,而液体发酵则要先液体培养霉菌呢?一般霉菌的干重大概是多少呢?谢谢哈!
6楼2012-05-13 20:56:25
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爱莉儿

新虫 (小有名气)

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7楼: Originally posted by launol123 at 2012-05-13 22:04:32:
我也在做红曲霉,我也有相关问题想要请教,孢子悬液中浓度怎么看,镜检看孢子个数吗?另外,红曲霉斜面洗过孢子后,先进行种子液培养2d,再做发酵培养,要做红曲霉的生长曲线的话,是不是要控制接种的孢子数?假 ...

孢子悬液可以通过镜检看,也可以涂布计数;我觉得应该控制种子液接种到发酵液中孢子数,因为这是最终设计孢子变量的步骤。我想请问一下,红曲霉进行种子液体培养,怎么确定种子需要培养几天呢?
8楼2012-05-14 08:42:45
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爱莉儿

新虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by launol at 2012-05-17 00:55:10:
有的文献是两天,也有的3天,一天的,我做的2天。可是种子液中孢子数怎么控制?我在想,假如用同一瓶种子液接种的话,是不是就不存在控制孢子数的问题了?因为接种体积数都一样啊?

可以把斜面上的孢子用无菌水(最好加点吐温)洗下来,然后计数,这样你每次取一定量的孢子液到种子液中,就可以知道种子液中初始孢子数量了。种子液也是液体培养,液体里面的孢子不好计数啊,因此我之前说“控制种子液接种到发酵液中孢子数”可能有点问题。可以按照初始接种孢子数到种子液中来定量,控制种子液接到发酵液中体积,以后每批都这样处理,应该就可以了吧。相互学习哈,不知道我说的是否清楚。

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10楼2012-05-17 14:24:44
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爱莉儿

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12楼: Originally posted by microxy at 2012-05-18 08:59:47:
说的很清楚了,呵呵  已经学会抢答了,知道用吐温了。

嘿嘿,多亏了你的指点啊
13楼2012-05-19 23:45:27
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