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dzdingo

铜虫 (小有名气)

[求助] 提取RNA前组织样品的保存已有2人参与

我需要从卵里面提取总RNA,因为卵的数量比较多,一次用不完,要放入-80的冰箱里保存。在网上查保存方法,有些说在放入-80冰箱前要先放在液氮中处理半个小时,有些说可以直接放入-80冰箱。我的理解是:保存前的处理都是要降低RNA酶的活性,既然-80可以长期保存组织,那么液氮处理也不是必需的吧。

问题如下:1、关于RNA酶活性。-80和液氮两种条件下RNA酶活性的区别大吗?
                 2、如果需要在液氮中处理,怎么处理,是放在ep管理然后直接投入液氮中吗?ep管用之前需要进行DEPC处理吗?在液氮中放的时间久了ep管不会出问题吧?处理完取出后直接就把ep管放入-80冰箱?
                 3、液氮处理的时间,多久合适?是固定的吗,还是根据组织来定,需要自己进行摸索?

由于我是第一次做,而且以前没什么分子生物学的基础,希望各位懂得的大哥大姐能给指点一下,小弟在此感激不尽。
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所谓医人z

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+3, 鼓励交流! 2014-06-08 02:52:14
我做过组织冻存,直接放在-80℃里面,感觉没什么影响。液氮没用过,刚好学习一下 (  ̄▽ ̄)"
4楼2014-06-08 00:21:24
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