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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助用于提RNA的动物肌肉样品保存问题
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助用于提RNA的动物肌肉样品保存问题 已有2人参与

各位大神好，我有一批样品，去年11月份取的样（差不多一年），液氮速冻后一直放在超低温冰箱，期间因为某些原因冻融过一次，并在-20放了4～5个小时，然后又转移到了超低温冰箱，然后现在想提RNA做荧光定量，不知道还能不能用啊，RNA会降解的很厉害吗？
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1楼 2012-10-08 11:18:37
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
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我认为化过的样品做RNA分析肯定是不好的。如果你的样品很珍贵，可以试试看。但我相信你的这些样品和其它的biological replicates肯定会存在一些差异。
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2楼2012-10-08 14:57:32
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xw19880905

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
短时间在-20度放置，可以试着做一下，有影响，但应该还是可以做
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3楼2012-10-08 16:07:12
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-08 14:57:32
我认为化过的样品做RNA分析肯定是不好的。如果你的样品很珍贵，可以试试看。但我相信你的这些样品和其它的biological replicates肯定会存在一些差异。

倒也没有化过，就是因为转移冰箱，先拿到冰上放了一会，又转移到-20冰箱里放了4～5个小时，然后就拿到-80了，这批样品很难取到啊，会对定量结果有很大的影响吗
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4楼2012-10-08 16:48:10
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-10-08 16:07:12
短时间在-20度放置，可以试着做一下，有影响，但应该还是可以做

一般动物肌肉样品在-80能放多久呢？
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5楼2012-10-08 16:48:51
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)
木有人呢？
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6楼2012-10-08 18:43:40
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)
顶顶顶
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7楼2012-10-08 20:07:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by dianbashuang at 2012-10-08 16:48:10
倒也没有化过，就是因为转移冰箱，先拿到冰上放了一会，又转移到-20冰箱里放了4～5个小时，然后就拿到-80了，这批样品很难取到啊，会对定量结果有很大的影响吗...

-80没化过的话放几个月应该没事儿，更长的我就没试过了。换冰箱的话，如果是提RNA的样品也最好从-80挪到-80。提蛋白的样放-20一会儿影响相对小些。既然你的样品难得，就用它试试吧。
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8楼2012-10-09 09:00:34
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-09 09:00:34
-80没化过的话放几个月应该没事儿，更长的我就没试过了。换冰箱的话，如果是提RNA的样品也最好从-80挪到-80。提蛋白的样放-20一会儿影响相对小些。既然你的样品难得，就用它试试吧。...

嗯，今天提了一批，有微弱降解不过影响不大
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9楼2012-10-09 18:55:59
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