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汕头大学海洋科学接受调剂
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助用于提RNA的动物肌肉样品保存问题 已有2人参与

各位大神好,我有一批样品,去年11月份取的样(差不多一年),液氮速冻后一直放在超低温冰箱,期间因为某些原因冻融过一次,并在-20放了4~5个小时,然后又转移到了超低温冰箱,然后现在想提RNA做荧光定量,不知道还能不能用啊,RNA会降解的很厉害吗?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我认为化过的样品做RNA分析肯定是不好的。如果你的样品很珍贵,可以试试看。但我相信你的这些样品和其它的biological replicates肯定会存在一些差异。
2楼2012-10-08 14:57:32
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xw19880905

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
短时间在-20度放置,可以试着做一下,有影响,但应该还是可以做
3楼2012-10-08 16:07:12
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-08 14:57:32
我认为化过的样品做RNA分析肯定是不好的。如果你的样品很珍贵,可以试试看。但我相信你的这些样品和其它的biological replicates肯定会存在一些差异。

倒也没有化过,就是因为转移冰箱,先拿到冰上放了一会,又转移到-20冰箱里放了4~5个小时,然后就拿到-80了,这批样品很难取到啊,会对定量结果有很大的影响吗
4楼2012-10-08 16:48:10
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xw19880905 at 2012-10-08 16:07:12
短时间在-20度放置,可以试着做一下,有影响,但应该还是可以做

一般动物肌肉样品在-80能放多久呢?
5楼2012-10-08 16:48:51
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

木有人呢?
6楼2012-10-08 18:43:40
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

顶顶顶
7楼2012-10-08 20:07:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by dianbashuang at 2012-10-08 16:48:10
倒也没有化过,就是因为转移冰箱,先拿到冰上放了一会,又转移到-20冰箱里放了4~5个小时,然后就拿到-80了,这批样品很难取到啊,会对定量结果有很大的影响吗...

-80没化过的话放几个月应该没事儿,更长的我就没试过了。换冰箱的话,如果是提RNA的样品也最好从-80挪到-80。提蛋白的样放-20一会儿影响相对小些。既然你的样品难得,就用它试试吧。
8楼2012-10-09 09:00:34
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dianbashuang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-09 09:00:34
-80没化过的话放几个月应该没事儿,更长的我就没试过了。换冰箱的话,如果是提RNA的样品也最好从-80挪到-80。提蛋白的样放-20一会儿影响相对小些。既然你的样品难得,就用它试试吧。...

嗯,今天提了一批,有微弱降解不过影响不大
9楼2012-10-09 18:55:59
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