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fanxinzeng

至尊木虫 (著名写手)

[求助] HPLC,所有的峰面积都比以前增大了已有9人参与

4月14日测的一个样品,今天再测的时候,所有组分的峰面积都比以前增大了,而且增大的幅度非常相似,大约在40-60%左右,如果说是组分发生了变化,峰面积应该有增有减才对吧?请问这可能是什么原因呢?
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fanxinzeng

至尊木虫 (著名写手)

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2楼: Originally posted by kusty08 at 2014-06-05 10:30:46
是不是放得太久溶剂挥发了?我刚开始做的时候也遇到这样的情况

样品里是没有溶剂的,只有在测样的时候才用溶剂溶解。
6楼2014-06-05 17:39:19
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至尊木虫 (著名写手)

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5楼: Originally posted by 秀古书生 at 2014-06-05 16:19:42
我觉得从两方面考虑:样品和测量系统;如果你是配制好了第一次用了,然后继续用这个配好的样品,那么一种可能性是你的样品本身不稳定,需要现配现用;另一种可能是样品储存时密封不严(这种可能很小);如果样品每次 ...

样品不稳定我因素,我也考虑过,但如果是变质,那么应该是有的组份峰面积比例增加,有的减少才对吧?现在 的情况是各个组分的峰面积都增大了。
和定量环会有关系吗?
7楼2014-06-05 17:40:53
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8楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-06-06 09:37:04
1、溶剂挥发造成浓度增加
2、定量环不准确,可清洗定量环
3、可能有残留,同样清洗进样针和定量环

非常感谢。根据您给出的分析,我觉得第2个是有可能的,浓度增加可能性不太大,因为我的样品基本上没什么挥发性,一般是在无溶剂状态下保存的,仅在测试样品的时候现配;残留的可能性也不太大,因为不是相继进两针,而是隔了一个多月才第二次测试。
我试试清洗定量环。
再次感谢您的赐教。
11楼2014-06-07 10:37:15
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9楼: Originally posted by 秀古书生 at 2014-06-07 09:10:09
你是手动进样吧?如果不是满环进样,会出现你说的情况;最好使用满环进样,这样是最准确的。...

的确是手动进样,对液相不够了解,还不知道有满环进样这个概念,呵呵,谢谢赐教!
我在工作站上设定的进样量是10ul,平常从六通阀里实际注入的量一般都在30 ul以上,请问如何去做到满环进样?
12楼2014-06-07 10:39:42
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至尊木虫 (著名写手)

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14楼: Originally posted by 1949stone at 2014-06-07 11:26:21
我的意思是你的检测器 看一下  有些情况当你开了参比的时候  吸收峰会变大 或者 变小

请问如果检测波长变了,会影响出峰面积吗?
16楼2014-06-07 13:56:14
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14楼: Originally posted by 1949stone at 2014-06-07 11:26:21
我的意思是你的检测器 看一下  有些情况当你开了参比的时候  吸收峰会变大 或者 变小

谢谢版主答复,检测器平时除了改波长,其他的参数我一般都不动的,因为不熟悉,比较胆小,呵呵。。
17楼2014-06-07 16:29:42
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至尊木虫 (著名写手)

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19楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-06-10 13:49:34
最近有新换氘灯吗?换了氘灯的话,肯定会有这种问题

没有换氘灯,呵呵。
21楼2014-06-10 17:45:22
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20楼: Originally posted by christally at 2014-06-10 14:48:28
是峰面积增加了还是峰面积百分比增加了,如果是前者应该是样品浓度或进样量比之前大了,若是后者感觉有点不太可能,应该是有增有减才对毕竟总和是100%固定的

百分比基本不变,是峰面积增加了。如果说是浓度改变,可能性不太大,样品第一次称了20.2mg,第二次是20.7mg,稀释方法相同如果是进样量,进样量不是由定量环控制的吗?
22楼2014-06-10 17:49:11
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