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286792125

铜虫 (小有名气)

[求助] 制备液相流动相的pH调节问题 已有3人参与

想请教一个问题,用液相做制备的时候,pH需要调节吗?
      我用甲酸和NaoH调节pH至3.5,收集到的组分,旋蒸,冷冻干燥处理,发现冻干后的样品都是白色粉末,应该是调pH引入的盐。这样很干扰目的产物,不知道各位做制备的时候调节流动相pH吗?或者是我调节的方法不对?
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主 调节流动相的PH值一般都是流动相中有盐的时候,甲酸调PH之前可以稀释一下,这样不容易调过了再用碱往回调,往回调的碱建议用季胺碱或者氨水就行吧,要保证生成的盐最终能除去就好。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
3楼2014-05-29 11:17:51
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

尽量避免用盐的,用挥发性酸或者碱,像甲酸,乙酸,三乙胺,氨水的,哪怕峰型差点也没关系的,反正是制备,只要分的开就好
9楼2014-05-31 10:07:26
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羽源

金虫 (小有名气)

1%甲酸+0.3%三乙胺

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2014-05-31 16:43:46
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羽源

金虫 (小有名气)

1%甲酸+0.3%三乙胺

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-05-31 16:46:46
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zhang宇微

金虫 (正式写手)

不特殊要求一般都不调

[ 发自小木虫客户端 ]
13楼2014-05-31 17:06:56
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再来一次

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 286792125 at 2014-05-31 16:18:56
哎 朋友 你说的很对,因为想用核磁鉴定它的结构,所以得冻干处理。我也想到单独脱盐了,用固相萃取柱脱盐,但是脱盐后的样品冻干完了又跑不出色谱峰了 所以想尽量减少处理步骤...

那是因为你的量太少,经过脱盐步骤后收率太低。建议加大制备体积,或许会得到满意的效果

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

14楼2014-06-01 20:05:05
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

引用回帖:
4楼: Originally posted by 286792125 at 2014-05-29 13:28:40
多谢回复,我也把样品溶于有机相了,但是那些冻干后的白色粉末也溶于有机相,并且过有机膜都除不去。 挥发性的盐,是不是加热一下,它就分解掉了?...

你样品里面的盐是甲酸铵,这溶于有机相,只能加热挥发试试了
人生若只如初见...
15楼2014-06-03 10:13:06
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普通回帖

daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
286792125: 金币+50, ★★★很有帮助, 20 2014-05-30 15:19:02
用挥发性的盐了,比如醋酸铵之类的
你现在可以试试用有机相溶解样品,把盐除掉

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人生若只如初见...
2楼2014-05-29 11:08:33
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286792125

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-05-29 11:08:33
用挥发性的盐了,比如醋酸铵之类的
你现在可以试试用有机相溶解样品,把盐除掉

多谢回复,我也把样品溶于有机相了,但是那些冻干后的白色粉末也溶于有机相,并且过有机膜都除不去。 挥发性的盐,是不是加热一下,它就分解掉了?
4楼2014-05-29 13:28:40
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286792125

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 炜少 at 2014-05-29 11:17:51
楼主 调节流动相的PH值一般都是流动相中有盐的时候,甲酸调PH之前可以稀释一下,这样不容易调过了再用碱往回调,往回调的碱建议用季胺碱或者氨水就行吧,要保证生成的盐最终能除去就好。

多谢你的建议,一会用氨水调节pH试试
5楼2014-05-29 13:29:39
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再来一次

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是蛋白的话,用超滤管试试
6楼2014-05-30 10:39:11
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286792125

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 再来一次 at 2014-05-30 10:39:11
如果是蛋白的话,用超滤管试试

谢谢回复,样品不是蛋白质,一种有机未知物。
7楼2014-05-30 15:20:15
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再来一次

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 286792125 at 2014-05-30 15:20:15
谢谢回复,样品不是蛋白质,一种有机未知物。...

那你为什么非要冻干呢,液体保存不行吗,或者单独做个脱盐
8楼2014-05-31 09:35:10
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286792125

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 再来一次 at 2014-05-31 09:35:10
那你为什么非要冻干呢,液体保存不行吗,或者单独做个脱盐...

哎 朋友 你说的很对,因为想用核磁鉴定它的结构,所以得冻干处理。我也想到单独脱盐了,用固相萃取柱脱盐,但是脱盐后的样品冻干完了又跑不出色谱峰了 所以想尽量减少处理步骤
10楼2014-05-31 16:18:56
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