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aiwuyun

新虫 (小有名气)

[求助] 药动实验中,血浆样品用二氯甲烷液液萃取的多吗?

药动实验中,血浆样品用二氯甲烷液液萃取的多吗?还是可以用二氯甲烷与乙醚,或者二氯甲烷与乙酸乙酯混合溶液萃取呢?待萃取物质为二氢欧山芹醇,欧前胡素,蛇床子素等香豆素类物质,极性较小。
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guangzhizi3

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-05-31 23:07:15
aiwuyun: 金币+25, 有帮助 2014-06-01 08:49:25
血浆样品很少用二氯甲烷的,一是这种溶剂毒性相对来说较大,二是其密度大于水,血浆样品萃取时,其处于水层下,与血浆蛋白共处一层,这导致很难取到澄清的二氯甲烷层。二氯甲烷倒是可以用来反提,达到除去杂质的目的。一般极性比较小的话,用乙醚、环己烷、正己烷比较多~或者几者之间混合后使用~乙酸乙酯提取的话,回收率可能会比较高,但是样品相对来说脏一点,吹干时也较慢,因为其中带有少部分的水~

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2楼2014-05-29 10:15:22
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励应助交流 2014-05-31 23:07:49
正己烷-二氯甲烷-异丙醇(2:1:0.1)先试试看,100微升血浆加2-3毫升萃取液,吹干后100微升流动相溶解

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3楼2014-05-29 11:10:26
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aiwuyun

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-05-29 11:54:32
乙醚和乙酸乙酯会萃取出来许多血浆内源性的基质,一般不推荐使用...

嗯,确实是,谢谢哦,试试你的方法
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11楼2014-05-29 18:59:46
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普通回帖

aiwuyun

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by guangzhizi3 at 2014-05-29 03:15:22
血浆样品很少用二氯甲烷的,一是这种溶剂毒性相对来说较大,二是其密度大于水,血浆样品萃取时,其处于水层下,与血浆蛋白共处一层,这导致很难取到澄清的二氯甲烷层。二氯甲烷倒是可以用来反提,达到除去杂质的目的 ...

试过好多种方法,都不太行,内源性干扰比较大,用二氯甲烷与乙醚的混合液稍好点
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4楼2014-05-29 13:41:34
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aiwuyun

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-05-29 04:10:26
正己烷-二氯甲烷-异丙醇(2:1:0.1)先试试看,100微升血浆加2-3毫升萃取液,吹干后100微升流动相溶解

之前用乙酸乙酯与异丙醇不同比例的试过,回收率等不太稳定,因考虑到血样中目标物含量较低,我们一般用200微升血浆,200微升血浆中加入2ml萃取剂够吗?
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5楼2014-05-29 13:59:51
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aiwuyun

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-05-29 04:10:26
正己烷-二氯甲烷-异丙醇(2:1:0.1)先试试看,100微升血浆加2-3毫升萃取液,吹干后100微升流动相溶解

再请问一下,你们用正己烷-二氯甲烷-异丙醇(2:1:0.1)这个方法时一般是测的哪一类物质呢?极性如何?谢谢
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6楼2014-05-29 14:04:07
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aiwuyun

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-05-29 04:10:26
正己烷-二氯甲烷-异丙醇(2:1:0.1)先试试看,100微升血浆加2-3毫升萃取液,吹干后100微升流动相溶解

我想测的那几个为香豆素内酯类物质,文献中大多直接用乙酸乙酯或与乙醚的混合试剂萃取,乙酸乙酯或乙醚及它俩几个比例都试过,效果都不好
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7楼2014-05-29 15:46:40
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guangzhizi3

铜虫 (小有名气)


辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-05-31 23:08:22
引用回帖:
4楼: Originally posted by aiwuyun at 2014-05-29 13:41:34
试过好多种方法,都不太行,内源性干扰比较大,用二氯甲烷与乙醚的混合液稍好点...

依你这种情况看,试试用环己烷-乙醚的混合。另外注意下稳定性问题对你试验的影响,可以试试控制下pH或加入酯酶抑制剂(酯类物质碱性条件下不太稳定,且易被酯酶水解)。另外,加入酸碱物质,还有可能使提取的选择性增加,使提取得更干净些~
8楼2014-05-29 16:39:54
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guangzhizi3

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by aiwuyun at 2014-05-29 13:41:34
试过好多种方法,都不太行,内源性干扰比较大,用二氯甲烷与乙醚的混合液稍好点...

乙酸乙酯的提取会杂质较多,但是回收率相对高,且稳定~也试试通过质谱条件的优化或者色谱条件的优化,排除干扰~
9楼2014-05-29 16:42:01
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)


辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-05-31 23:08:37
引用回帖:
7楼: Originally posted by aiwuyun at 2014-05-29 15:46:40
我想测的那几个为香豆素内酯类物质,文献中大多直接用乙酸乙酯或与乙醚的混合试剂萃取,乙酸乙酯或乙醚及它俩几个比例都试过,效果都不好...

乙醚和乙酸乙酯会萃取出来许多血浆内源性的基质,一般不推荐使用

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10楼2014-05-29 18:54:32
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