| 查看: 7403 | 回复: 82 | ||||
[交流]
细胞冻存有遇到过这些问题吗？
|
||||
|
很多珍贵的细胞株，冻存后很难复苏，或者复苏后出现大量死亡，不知大家都是怎么处理的，是否解决了这些问题？ 我先说说我最近遇到的问题吧。 培养物：杂交瘤细胞 冻存液：90%FBS+10%DMSO 冻存过程：(泡沫盒) -70℃过夜→转液氮保存 复苏过程：40℃水浴→90s内，溶解→1500 rpm，3 min→弃上清，培养基重悬→T75培养瓶培养，5% CO2,37℃，DMEM+20%FBS+双抗 问题：部分细胞复苏之后，大量死亡，有的甚至全部死亡；此类细胞中，部分细胞复苏起来后死的就很多，部分细胞过几个小时后死亡 作出的努力：1、在添加饲养细胞的24孔板内复苏，能抢救一部分，但耗时 2、冻存数目增加，占的位置太多，且仍然不能解决 3、试过不同的冻存液配方，FBS20%、50%、90%都没有明显的改善 最近一次发现，-70保存后复苏比液氮保存后复苏的效果要好很多，这说明我在转液氮的时候出问题了么？可是不是很明白会出啥问题呢~~ 请大家都来说一说哈！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 资源 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
Gary张» 猜你喜欢
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗
已经有13人回复
-
博士申请都是内定的吗？
已经有6人回复
-
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？
已经有5人回复
-
博士读完未来一定会好吗
已经有29人回复
-
投稿精细化工
已经有4人回复
-
高职单位投计算机相关的北核或SCI四区期刊推荐，求支招！
已经有4人回复
-
导师想让我从独立一作变成了共一第一
已经有9人回复
-
读博
已经有4人回复
-
心脉受损
已经有5人回复
-
Springer期刊投稿求助
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
细胞培养过程中培养液变黄
已经有22人回复- HL-60细胞形态判断细胞生长状况以及是否传代冻存？
已经有4人回复
- RAW264.7细胞的培养问题-----传代、冻存和复苏
已经有15人回复
- 细胞培养基能冷冻吗
已经有9人回复
- 细胞冻存离心速度问题~
已经有22人回复
- 菜鸟问题：细胞保存在液氮罐液相还是气相中？
已经有5人回复
- DMSO在使用过程中没有避光对细胞冻存有多大的影响？
已经有6人回复
- 细胞冻存有段时间后要复苏养段时间再冻么
已经有13人回复
- 【资料】细胞冻存与细胞复苏标准操作规程（SOP）--word文档
已经有589人回复
- 【求助/交流】细胞保存温度
已经有10人回复
- 【求助/交流】293T细胞里面有小颗粒，细胞不贴壁，无法继续培养
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌感受态细胞保存的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】细胞冻存时冻存管中的冻存液变黄色怎么回事
已经有16人回复
- 【求助/交流】流式细胞仪的样品测定前可以冻存吗？
已经有6人回复
- 【求助/交流】冻存细胞时细胞密度的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】可以用冻存管寄细胞吗？
已经有5人回复
- 【求助/交流】细胞培养时出现黑点点,污染 了吗?
已经有15人回复
ankang0910
金虫 (正式写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 826
- 散金: 2008
- 红花: 6
- 帖子: 330
- 在线: 146.6小时
- 虫号: 1062441
- 注册: 2010-07-22
- 性别: GG
- 专业: 医学免疫学
40楼2014-05-28 16:52:11
chentao
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 84798.2
- 红花: 7
- 帖子: 64073
- 在线: 984.2小时
- 虫号: 203675
- 注册: 2006-03-02
- 专业: 催化化学
2楼2014-05-28 15:52:04
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
， [ 发自小木虫客户端 ] |
3楼2014-05-28 15:53:00
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
 |
4楼2014-05-28 15:59:32
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
|
5楼2014-05-28 16:00:28
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
|
6楼2014-05-28 16:02:39
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
|
7楼2014-05-28 16:04:34
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
|
8楼2014-05-28 16:07:30
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
|
9楼2014-05-28 16:07:31
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
|
10楼2014-05-28 16:08:17