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米粒儿308

铁虫 (初入文坛)

[求助] 克隆5KB左右的基因,两个多月了还没进展,求帮忙啊!!!! 已有9人参与

本人是个新手,现在要克隆个5kb的基因,已经进行了两个多月了还没进展,不知道该怎么办,那位大侠能帮帮忙啊?
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-05-16 13:12:37
建议:
1.退火温度太高,建议55度。
2.延伸时间太短,建议5-6分钟。
3.以上改进后还不行就重新设计引物。
4.直接从ABRC订购BAC克隆,可以在TAIR上查到,用BAC克隆的质粒做模板肯定可以扩出来。
18楼2014-05-15 21:37:13
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