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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 本人做WB时候出现的几个问题，想请教一下各位
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huang.m.yang

新虫 (初入文坛)

[交流] 本人做WB时候出现的几个问题，想请教一下各位 已有2人参与

1.如图最近经常出现这种情况，上样时候还没有，只要接通电源就会出现这样的情况，做了4-5次，最初是怀疑制胶问题，凝固时间不够，改成4℃过夜也会出现这样的情况，现在不知道怎么办了，上样量是30ul用的是5x的loading buffer  
2.marker跑不出条带，用的是预染的大分子marker，跑SDS可以看到清晰的条带，但是转膜后条带消失，是不是转过了还是缓冲液问题？？用的是100v 600mA横流跑的，缓冲液含SDS
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1楼 2014-05-04 12:50:04
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、可能是胶太干了，加样品会从胶和板之间空隙流出
2、应该是缓冲液的问题，转膜液最好要现配现用，一般用300mA转膜
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3楼2014-05-04 15:42:07
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duowan17

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
600mA横流？这么高吗？这电流也太大了吧
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2楼2014-05-04 15:32:28
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