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本人做WB时候出现的几个问题,想请教一下各位
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huang.m.yang
新虫
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专业: 生物防治
[交流]
本人做WB时候出现的几个问题,想请教一下各位
已有2人参与
1.如图最近经常出现这种情况,上样时候还没有,只要接通电源就会出现这样的情况,做了4-5次,最初是怀疑制胶问题,凝固时间不够,改成4℃过夜也会出现这样的情况,现在不知道怎么办了,上样量是30ul用的是5x的loading buffer
2.marker跑不出条带,用的是预染的大分子marker,跑SDS可以看到清晰的条带,但是转膜后条带消失,是不是转过了还是缓冲液问题??用的是100v 600mA横流跑的,缓冲液含SDS
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1楼
2014-05-04 12:50:04
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duowan17
金虫
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帖子: 458
在线: 55.7小时
虫号: 1760242
注册: 2012-04-17
专业: 畜牧学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
600mA横流?这么高吗?这电流也太大了吧
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2楼
2014-05-04 15:32:28
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猪尾巴草
新虫
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应助: 25
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金币: 99.8
帖子: 58
在线: 15.3小时
虫号: 3084198
注册: 2014-03-24
专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、可能是胶太干了,加样品会从胶和板之间空隙流出
2、应该是缓冲液的问题,转膜液最好要现配现用,一般用300mA转膜
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3楼
2014-05-04 15:42:07
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