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女孩当自强

木虫 (正式写手)

Queen

[求助] 蛋白超声会失活吗? 已有3人参与

我用EDC和NHSS活化带有羧基的纳米粒子,然后连IgG

离心之后能超声分散吗???会不会使蛋白失活?

看有人说超声功率过高和时间长的话,会降解蛋白或者断裂蛋白?那么对人-IgG来说,超声功率多大保险啊?超声时间呢?
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

人-IgG估计不容易检验是否功能被损坏,但是酶可以,用超声波破坏大肠杆菌细胞壁释放重组表达的酶是很正常的技术。另外,合适的超声波处理是能提高酶的活力的,不一定会损害,但是也不一定就不损害。至于是否断裂,SDS-PAGE或许可以,但最好还是用功能验证。

你先做实验,如果做不出来再考虑这个问题,如果成功就不用费心了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2014-12-10 01:30:19
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cmzbf1011

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
女孩当自强: 金币+2 2014-04-11 09:20:02
可以超声30s停30s或者超5s停10s这样试试
2楼2014-04-05 20:49:00
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女孩当自强

木虫 (正式写手)

Queen

引用回帖:
2楼: Originally posted by cmzbf1011 at 2014-04-05 20:49:00
可以超声30s停30s或者超5s停10s这样试试

一般用什么方式来检测蛋白是否还完好呢?
迷茫,只不过是才华配不上你的梦想
3楼2014-04-06 11:12:10
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cmzbf1011

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 女孩当自强 at 2014-04-06 11:12:10
一般用什么方式来检测蛋白是否还完好呢?...

没做过多少实验,不是很清楚。一般放冰里,用35%超声,不要连续的超声,应该不会有问题,可以用凝胶电泳看一下
4楼2014-04-06 22:21:16
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