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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白超声会失活吗？
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女孩当自强

木虫 (正式写手)

Queen

[求助] 蛋白超声会失活吗？ 已有3人参与

我用EDC和NHSS活化带有羧基的纳米粒子，然后连IgG

离心之后能超声分散吗？？？会不会使蛋白失活？

看有人说超声功率过高和时间长的话，会降解蛋白或者断裂蛋白？那么对人-IgG来说，超声功率多大保险啊？超声时间呢？
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迷茫，只不过是才华配不上你的梦想
1楼 2014-04-04 15:44:17
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cmzbf1011

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
女孩当自强: 金币+2 2014-04-11 09:20:02
可以超声30s停30s或者超5s停10s这样试试
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2楼2014-04-05 20:49:00
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女孩当自强

木虫 (正式写手)

Queen
引用回帖:
2楼: Originally posted by cmzbf1011 at 2014-04-05 20:49:00
可以超声30s停30s或者超5s停10s这样试试

一般用什么方式来检测蛋白是否还完好呢？
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迷茫，只不过是才华配不上你的梦想
3楼2014-04-06 11:12:10
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cmzbf1011

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 女孩当自强 at 2014-04-06 11:12:10
一般用什么方式来检测蛋白是否还完好呢？...

没做过多少实验，不是很清楚。一般放冰里，用35%超声，不要连续的超声，应该不会有问题，可以用凝胶电泳看一下
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4楼2014-04-06 22:21:16
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可儿不苦

金虫 (著名写手)
亲你超声了吗？有没有影响
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幸福那一个美梦，是二人同行才有。
5楼2014-12-08 15:37:31
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女孩当自强

木虫 (正式写手)

Queen
引用回帖:
5楼: Originally posted by 可儿不苦 at 2014-12-08 15:37:31
亲你超声了吗？有没有影响

最好不要超声
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迷茫，只不过是才华配不上你的梦想
6楼2014-12-09 10:43:55
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lietomepls

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by cmzbf1011 at 2014-04-06 22:21:16
没做过多少实验，不是很清楚。一般放冰里，用35%超声，不要连续的超声，应该不会有问题，可以用凝胶电泳看一下...

凝胶电泳能检测蛋白是否失活吗？我怎么不知道。
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7楼2014-12-09 13:54:40
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可儿不苦

金虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 女孩当自强 at 2014-12-09 10:43:55
最好不要超声...

我打算超声20S试试
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幸福那一个美梦，是二人同行才有。
8楼2014-12-09 22:12:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

人-IgG估计不容易检验是否功能被损坏，但是酶可以，用超声波破坏大肠杆菌细胞壁释放重组表达的酶是很正常的技术。另外，合适的超声波处理是能提高酶的活力的，不一定会损害，但是也不一定就不损害。至于是否断裂，SDS-PAGE或许可以，但最好还是用功能验证。

你先做实验，如果做不出来再考虑这个问题，如果成功就不用费心了。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2014-12-10 01:30:19
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