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小甜瓜lemon银虫 (小有名气)
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[交流]
请教做过人类基因外显子测序的朋友
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人类的已知基因（NCBI有序列）如果比较大，外显子数目比较多，会不会比较难做全外显子测序？难在哪里？（用PCR扩增、一代测序技术） 比如60个、70个外显子，设计引物做PCR，之后利用PCR产物进行一代测序，会出现很多困难吗？返工率会很高吗？ |
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可以做，但做好返工准备，因为每个外显子序列特征不一样，尤其样本DNA不好的时候，不太好测；另外，有的区段如果测序质量不好，出现杂峰的话，需要双向测序验证 我们做过一个基因，总测序量大概是理论测序个数的1.5倍 如果外显子太多的话，倒不如直接作全外显子组测序（whole-exome sequencing），现在降价很厉害，几千RMB一个样，全基因组的外显子序列都有了 |
3楼2014-04-03 11:18:30
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