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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 菌体培养的问题？
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lingkai11111

新虫 (小有名气)

[求助] 菌体培养的问题？ 已有3人参与

有两个问题想问下各位学长学姐
1 种子培养后，工程菌种子液静置了几个小时对菌体有影响吗？会不会溶氧不足导致有害物质的产生或者对菌体有影响
2 发酵结束后，没有及时破碎，发酵液一直放在4摄氏度冰箱里有问题吗？或者离心后但是没有破碎的菌体放在-20摄氏度的冰箱里，会有影响吗？
谢谢
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1楼 2014-04-01 20:21:15
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无为之人

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主文献杰出贡献优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, good！ 2014-04-02 22:50:42
1、种子培养后，工程菌种子液静置的话，溶氧不足会造成菌体会自溶；
2、发酵液可以较短时间放在4摄氏度冰箱，时间长菌体也大量自溶，因为发酵液中代谢产物复杂；离心后但是没有破碎的菌体放在-20摄氏度的冰箱里，我认为影响不大。
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人生如戏，是在高潮和低谷之间跳动的旋律！
2楼2014-04-01 21:01:45
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lingkai11111

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 无为之人 at 2014-04-01 21:01:45
1、种子培养后，工程菌种子液静置的话，溶氧不足会造成菌体会自溶；
2、发酵液可以较短时间放在4摄氏度冰箱，时间长菌体也大量自溶，因为发酵液中代谢产物复杂；离心后但是没有破碎的菌体放在-20摄氏度的冰箱里，我 ...

放-20度冰箱里面对酶活有影响吗？因为我做不同诱导时间对酶活影响，由于客观条件要一起破碎一起测酶活，从第一瓶到最后一瓶中间间隔24小时！怎么办？能离心后放-20度冰箱吗？该怎么解决哈，谢了！

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3楼2014-04-02 11:12:10
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无为之人

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主文献杰出贡献优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by lingkai11111 at 2014-04-02 11:12:10
放-20度冰箱里面对酶活有影响吗？因为我做不同诱导时间对酶活影响，由于客观条件要一起破碎一起测酶活，从第一瓶到最后一瓶中间间隔24小时！怎么办？能离心后放-20度冰箱吗？该怎么解决哈，谢了！
...

个人建议：细胞离心出来，放4摄氏度冰箱保存，24H对酶活力应该影响不大。
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lingkai11111
人生如戏，是在高潮和低谷之间跳动的旋律！
4楼2014-04-02 11:23:06
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lingkai11111

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 无为之人 at 2014-04-02 11:23:06
个人建议：细胞离心出来，放4摄氏度冰箱保存，24H对酶活力应该影响不大。...

知道了，谢谢，但是我想知道，为什么放4度而不是24度呢？

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5楼2014-04-02 12:05:20
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aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、如果是芽孢杆菌的话，种子还是重新制吧。

2、发酵液放4度，时间长了容易污染变质，产物降解；菌体放-20度，要看你的目的产物的具体性质了。
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6楼2014-04-03 09:48:17
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zzl198338

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这两个问题都有影响。
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7楼2014-04-03 14:40:07
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