24小时热门版块排行榜

返回列表

冰糖-葫芦娃

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 13
帖子: 36
在线: 35.4小时
虫号: 2546726
注册: 2013-07-15
专业: 有机化工

[求助] 培养感受态大肠杆菌，请问长出来这样的菌株正常么？连续两天都是这样的（见图）已有4人参与

打算将目的基因片段连接到载体上，再导入到大肠杆菌做蓝白斑筛选，这次是想试试，用涂布器在LB培养基上涂布，未加IPTG和X-Gal。LB培养基有些硬，不知是培养基偏碱还是琼脂放多了。固体培养基配了200ml,琼脂放了4克。

IMG_20140320_150928.jpg

IMG_20140320_151026.jpg

IMG_20140320_151056.jpg

IMG_20140320_151335.jpg

IMG_20140320_151350.jpg

IMG_20140320_151416.jpg

回复此楼

» 猜你喜欢

售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急已经有5人回复
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有7人回复
上海工程技术大学激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生已经有6人回复
课题组招2027级博士上海工程技术大学激光智能制造方向已经有6人回复
现代”学阀”该如何界定已经有14人回复
师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？已经有4人回复
有机合成以后会不会被AI改变？做科研的虫友怎么看已经有8人回复
我的奶奶已经有3人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

有没有人做过Inoue大肠杆菌超级感受态的啊。。求助啊！！！已经有7人回复
大肠杆菌感受态细胞已经有5人回复
关于购买大肠杆菌感受态是否可以重新接种已经有6人回复
大肠杆菌感受态加甘油至50%会不会对转化效率有影响？已经有10人回复
大肠杆菌DH5α感受态制备已经有21人回复
那些大肠杆菌感受态是Dam+型，基因可被DpnI降解已经有6人回复
大肠杆菌感受态细胞的制备已经有10人回复
大肠杆菌感受态转化子总是空载体，请高手指点已经有55人回复
大肠杆菌电转感受态细胞的制备中遇到的问题已经有8人回复
大肠杆菌DH5a作感受态，PMD-19T载体连接重组的问题已经有3人回复
SOB培养基与LB培养基做大肠杆菌感受态哪个更好已经有7人回复
【求助/交流】大肠杆菌BL21(DE3)、TG1用作感受态时有何异同？已经有4人回复
【求助/交流】急求：高效制备大肠杆菌感受态细胞试剂盒的solutionA 和solutionB 的成� 已经有4人回复
【求助/交流】关于大肠杆菌感受态细胞保存的问题已经有7人回复
【求助/交流】大肠杆菌感受态制备及转化中的问题已经有3人回复
【求助/交流】大肠杆菌DH5α感受态细胞制备求助已经有19人回复
【求助/交流】大肠杆菌感受态污染问题已经有21人回复

1楼 2014-03-20 19:58:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

rv1nm2y

银虫 (小有名气)

应助: 17 (小学生)
金币: 358.9
红花: 3
帖子: 137
在线: 34.2小时
虫号: 2518605
注册: 2013-06-23
性别: MM
专业: 微生物遗传育种学

引用回帖:

7楼: Originally posted by 冰糖-葫芦娃 at 2014-03-23 17:44:50
是啊。。那下一步我想挑周边的一些单菌落做一下PCR，想看看目的片段转没转到质粒上，是将单菌落挑到加有氨苄的LB液体培养基里培养过夜，然后用这个菌液直接PCR么？还是提取质粒做PCR？如果这样该如何操作呢？有些茫 ...

做菌落PCR吧。我做的是真菌，就是挑取少量菌落放在离心管里，离心管里有专门溶解菌壁的酶，随后在37℃条件下放置3小时作用，使反应充分。
随后就是按照PCR的配置方法，直接吸取菌做PCR，跑琼脂糖电泳，如果条带很亮，就是阳性，那么就是转进去了，如果比较暗，有可能是假阳性，则可能转进去可能没转进去，如果没有，那就是没转进去。

仅作参考，毕竟菌不一样